目的:分析龋病患儿唾液离子浓度、链球菌、双歧杆菌变化与病情的关联性.方法:选择2022年5月-2023年4月收治的80例3～6岁龋病患儿为试验组,根据龋失补指数(DMFT)分为轻度组(DMFT≤15％,n=35)和重度组(DMFT＞15％,n=45);另选择进行健康检查的80例3～6岁无龋病患儿为对照组.采用甲基麝香酚蓝检测唾液中钙离子浓度,采用实时定量PCR技术检测链球菌、双歧杆菌水平,采用Pearson分析DMFT与唾液钙离子浓度、链球菌、双歧杆菌的相关性,并采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评估唾液钙离子浓度、链球菌、双歧杆菌对龋病患儿病情严重程度的诊断价值,计算曲线下面积(area under the curve,AUC).采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析.结果:试验组唾液钙离子浓度、变形链球菌、远缘链球菌和双歧杆菌水平显著高于对照组(P＜0.05);重度组显著高于轻度组(P＜0.05);DMFT与唾液钙离子浓度、链球菌、双歧杆菌呈正相关(P＜0.05).根据DMFT制作ROC曲线,唾液钙离子浓度、变形链球菌、远缘链球菌和双歧杆菌对评估龋病患儿病情严重程度的AUC分别为0.760、0.658、0.718和0.705.结论:唾液离子浓度、变形链球菌、远缘链球菌和双歧杆菌水平增加与患儿龋病有关,与龋病病情程度呈正相关,对评估病情严重程度有一定价值.

目的 为对公共场所空调系统有害微生物进行有效检测与预防,本研究拟建立空调通风系统中重要致病菌——马链球菌(Streptococcus equi)的高效、特异的PCR检测方法.方法 基于序列相似性比对方法挖掘物种特异DNA片段,设计扩增引物并优化PCR条件,通过梯度稀释法构建不同浓度DNA模板并检测PCR扩增效果,确定PCR检测灵敏度.结果 从马链球菌基因组序列中挖掘到6个特异的DNA区段,长度分别为233、189、74、54、112、196bp.以189bp的特异DNA片段为检测靶标设计PCR引物,优化确定最优退火温度为58.4℃,确定该引物能有效区分马链球菌的多个近缘种;当PCR循环数为25、30、35时,20 μl PCR扩增体体系最低可检出400 fg(1.27×105拷贝)、4 fg(1.273×103拷贝)、0.4 fg(1.27×102拷贝)的模板DNA.结论 本研究建立的马链球菌PCR检测体系具有很好的物种特异性,检测灵敏度远高于多个已报道的马链球菌PCR检测体系,为公共场所空调系统有害微生物马链球菌的防控提供了新的技术选择.

目的 探讨氟化钠护齿剂对幼儿园儿童乳牙患龋率和龋面变化的影响.方法 选取2017年1月本地区10所公办幼儿园共 330名儿童作为研究对象,随机分为三组,每组各 110 名儿童,A组给予氟化钠护齿剂(含5%氟化钠)0.2 mL/次,1次/年;B组给予入氟化钠护齿剂0.1 mL/次,1次/年;C组儿童作为空白对照组,记录涂氟后三组儿童2年内乳牙患龋率、龋面均、新增龋面变化、致龋菌检出情况以及涂氟后尿氟浓度变化.结果 A组与B组干预后第2年龋齿发生率分别为37.27%、39.09%低于C组51.82%(P＜0.05);A组、B组第1年、第 2 年龋均值低于C组(P＜0.05);A组与B组儿童涂氟后第 1 年与第 2 年乳牙颊舌面、邻面、牙合面新生龋面均值低于C组(P＜0.05);A组与B组儿童干预第2年变形链球菌、远缘链球菌、乳杆菌检出率低于C组(P＜0.05);A组、B组儿童涂氟后6 h、12 h尿氟浓度高于C组儿童(P＜0.05);三组儿童涂氟后24 h、48 h尿氟浓度比较差异无统计学意义(P＞0.05);A组与B组儿童涂氟后龋齿发生率、龋均值、新生龋面、致龋菌检出率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 氟化钠的应用可降低幼儿园儿童龋齿发生率,减少新生龋面,降低致龋菌检出率,无需涂布过多剂量的氟化钠即可达到较好的防龋效果,安全性较高.

目的:探究慢性牙周炎(CP)龈下菌群与龈沟液炎症因子及种植修复后种植体周围骨吸收的关系.方法:选取行种植修复的108例CP牙列缺损患者纳入CP组,另选取50例同时期牙周健康的牙列缺损患者作为对照组.比较两组患者种植修复前后龈下菌群分布情况、龈沟液炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]水平及修复后3个月种植体周围骨吸收情况,采用Pearson相关性分析CP患者术前龈下菌群数量与龈沟液炎症因子及修复后3个月种植体周围骨吸收量的相关性.结果:两组种植修复后3个月龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(P.g)、中间普氏菌(P.i)、具核梭杆菌(F.n)、粘性放线菌(A.v)、变形链球菌(S.m)数量均较修复前下降(P<0.05),且CP组修复前后P.g、P.i、F.n、A.v、S.m菌群数量均大于对照组(P<0.05);两组修复后3个月龈沟液IL-6、IL-1β、MMP-9水平均较修复前下降,且CP组修复前后水平均大于对照组(P<0.05);CP组修复后3个月种植体周围近中、远中边缘骨吸收量均大于对照组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,CP组龈下P.g、P.i、F.n、A.v、S.m菌群数量与龈沟液IL-6、IL-1β、MMP-9水平及种植修复后3个月近中、远中边缘骨吸收量均呈正相关关系(P<0.05).结论:CP患者龈下菌斑中P.g、P.i、F.n、A.v、S.m菌群数量的增加与局部炎症加重及种植修复后种植体周围骨吸收密切相关.

目的 本研究旨在评价和分析胃癌前病变患者口腔中龋病和牙周病主要致病菌的分布,探索胃癌患者口腔感染性疾病主要致病菌与健康人群的差异,为口腔疾病与胃癌的相关性的机制研究提供线索.方法 按病理诊断结果,将研究对象分为胃癌前病变组和对照组.提取唾液和牙菌斑样本DNA,进行实时定量PCR,所得数据用χ2检验比较不同细菌的分布情况,Mann-Whitney非参数检验比较不同组别细菌的DNA水平的差异.结果 病例和对照组的唾液中的变异链球菌(Streptococcus mutans,Sm)和远缘链球菌(Streptococcus sobrinus,Sb)2种龋病相关主要致病菌,无论是检出率还是DNA水平均没有显著性差异.病例和对照组的唾液和牙菌斑中牙周病主要病原菌牙密螺旋体(Treponema denticola,Td)、伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)和福赛斯坦纳菌(Tannerella forsythensis,Tf)的DNA水平均高于对照组,Aa在两组中差异具有统计学意义(P<0.05).唾液样本中Pg的DNA水平在两组间则颇为相近,病例组稍低于对照组.牙菌斑样本中的Pg则是病例组略高于对照组,差异不具有统计学意义.结论 胃癌前病变患者口腔中被测的龋病主要致病菌与未见差异,而牙周主要致病菌的含量与健康对照人群有所不同.伴放线放线杆菌可能在胃癌与牙周病相关性中发挥作用.

目的 采用三维荧光光谱分析技术对口腔常见致龋菌荧光光谱特征进行初步分析.方法 选择口腔常见致龋菌变形链球菌及远缘链球菌,对其进行复苏和培养,运用三维荧光光谱分析技术对其菌液进行荧光学光谱检测.结果 变形链球菌及远缘链球菌的三维荧光光谱图相似,均出现2个荧光峰,最佳激发波长分别位于230 nm和280 nm,最佳发射波长相同,均为340 nm.结论 成功获得口腔常见致龋菌(变形链球菌及远缘链球菌)的固有荧光三维光谱图,为致龋菌荧光评价技术的应用提供参考.

目的:探讨噬菌体裂解酶ClyR对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)和远缘链球菌(Streptococcus sobrinus,S.sobrinus)临床株的杀菌作用.方法:收集重度低龄儿童龋(severe early childhood caries,SECC)患者牙菌斑标本进行厌氧培养,通过菌落形态、生化鉴定、16S rDNA序列分析等方法对获得的临床株进行鉴定.通过细菌浊度A 600的降低和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)评价ClyR的杀菌效果.透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)初步探究ClyR的杀菌作用机制.结果:从分离得到的菌株中随机挑选10株S.mutans和10株S.sobrinus进行杀菌活性测试,50 mg/L ClyR对8株S.mutans有明显杀菌作用,其MBC范围为125 mg/L至＞1000 mg/L不等;对3株S.sobrinus有杀菌作用,其MBC范围为125～500 mg/L不等.TEM观察结果表明ClyR可在细菌细胞壁上打孔,从而使细菌发生渗透性死亡.结论:ClyR对S.mutans和S.sobrinus均有较强的杀菌作用,但对S.mutans杀菌作用较S.sobrinus强,或许可以作为一种防龋药物应用于临床.

病例资料 患者,女,咳嗽、咳痰10余天.起病时曾有发热(具体未测),无其它不适症状,于当地卫生院输液1天后,发热消退,咳嗽稍好转,但3天前出现前胸隐痛收住入院.平素身体一般.曾患肺结核,经诊断性抗结核治疗1年后停药.入院查:体温37.1℃,脉搏86次/分,呼吸19次/分,血压100/65 mmHg.胸部CT示:左下肺团块影,边缘光整,其内有结节状高密度影,远端支气管阻塞,有多发囊柱状低密度影,增强后团状病灶有不均匀强化,囊柱状低密度影未见强化,见图1.血液检验示:抗链球菌溶血素“O”偏高(138IU/ml),呼吸道病原体九联检示肺炎支原体:弱阳性,余未见明显异常.

目的 研究青皮提取物对6种主要致龋菌生长的影响,基于网络药理学方法探讨青皮潜在的防龋机制.方法 采用液体稀释法测定6种主要致龋菌最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC).基于TCMSP数据库获取青皮化学成分及其对应靶点,通过Gene Cards、OMIM数据库获取龋病靶点,将药物与疾病靶点映射得到青皮化学成分的预测靶点.构建成分-靶点调控网络及蛋白-蛋白相互作用网络,利用DAVID数据库分析预测靶点的GO富集分析,利用Kobas数据库分析预测靶点的KEGG富集分析.结果 青皮提取物对变形链球菌、血链球菌、远缘链球菌、黏性放线菌、内氏放线菌和嗜酸乳杆菌MIC分别为1.0、0.5、1.0、2.0、2.0、2.0 g/L,MBC分别为2.0、1.0、2.0、4.0、4.0、4.0 g/L.网络药理学方法得到青皮化学成分12个,靶点28个,关键化学成分包括新橙皮苷、柚皮素、川陈皮素等,关键靶点包括TNF、CAT、MMP9等.KEGG富集分析得到AGE-RAGE、NF-κB等信号通路.结论 青皮提取物对6种主要致龋细菌生长具有显著抑制作用,网络药理学揭示了其化学成分防治龋病的药理基础及作用机制,能为后续从青皮中开发防龋药物提供实验和理论依据.

目的 研究新疆软紫草粗提物对口腔主要致龋菌浮游状态及生物膜的生长、产酸、产糖、粘附的体外作用.方法 通过微孔板法测定新疆软紫草粗提物对口腔主要致龋菌单菌最小抑菌浓度及生长抑制率,涂布平板法测定最小杀菌浓度;通过微量滴定板法测定新疆软紫草粗提物对口腔主要致龋菌单菌生物膜最低形成抑制浓度、生物膜最低清除浓度、最低清除已形成生物膜浓度;通过△PH值法测定2倍最小抑菌浓度、生物膜最低清除浓度及以下三个浓度新疆软紫草粗提物对测试菌株单菌浮游状态及生物膜产酸能力的影响,苯酚硫酸法测定2倍最小抑菌浓度、生物膜最低清除浓度及以下三个浓度新疆软紫草粗提物对测试菌株单菌浮游状态及生物膜产水不溶性胞外多糖能力的影响;采用玻壁法测定2倍最小抑菌浓度及以下三个浓度新疆软紫草粗提物对测试菌株单菌粘附能力的影响.结果 新疆软紫草粗提物对变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、内氏放线菌、粘性放线菌和嗜酸乳杆菌的最小抑菌浓度分别为1,4,1,2,4,1mg/mL,最小杀菌浓度分别为8,8,4,4,8,4mg/mL,新疆软紫草粗提物对变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、内氏放线菌、粘性放线菌和嗜酸乳杆菌的生物膜最低形成抑制浓度分别为4,4,2,2,4,2mg/mL,生物膜最低清除浓度分别为16,16,8,16,16,8mg/mL,最低清除已形成生物膜浓度分别为8,16,8,8,8,8mg/mL;2倍最小抑菌浓度,生物膜最低清除浓度及以下三个浓度新疆软紫草粗提物对测试菌株的浮游状态及生物膜产酸及产水不溶性多糖的能力均有抑制作用,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);2倍最小抑菌浓度及以下三个药物浓度新疆软紫草粗提物均可抑制测试菌株的粘附能力,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 新疆软紫草粗提物对口腔主要致龋细菌单菌浮游状态及生物膜的生长、产酸、产糖、粘附均具有一定抑制作用.