目的:评价G蛋白偶联受体30(GPR30)在17β雌二醇减轻氯胺酮致发育期大鼠远期认知功能障碍中的作用。方法:7日龄健康雄性SD大鼠30只，体重11~18 g，采用随机数字表法分为5组( n＝6)：对照组(C组)、氯胺酮组(K组)、17β雌二醇+氯胺酮组(EK组)、GPR30激动剂G1+氯胺酮组(G1K组)和GPR30抑制剂G15+17β雌二醇+氯胺酮组(G15EK组)。K组腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，EK组皮下注射17β雌二醇600 μg/kg，腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，G1K组皮下注射G1 200 μg/kg和腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，G15EK组皮下注射G15 300 μg/kg和17β雌二醇600 μg/kg以及腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，C组腹腔注射等容量生理盐水。每隔24 h注射1次，连续注射3 d。所有大鼠饲养至60日龄，采用Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能。于水迷宫实验结束后处死大鼠取海马，采用ELISA法检测海马乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱(ACh)的含量。 结果:与C组比较，K组大鼠第3~5天逃避潜伏期延长，穿越平台次数及靶象限停留时间百分比减少，海马AChE含量增加，ACh含量减少( P<0.05)；与K组比较，EK组和G1K组大鼠第3~5天逃避潜伏期缩短，穿越平台次数及靶象限停留时间百分比增加，海马AChE含量减少，ACh含量增加( P<0.05)；与EK组和G1K组比较，G15EK组大鼠第3~5天逃避潜伏期延长，穿越平台次数及靶象限停留时间百分比减少，海马AChE含量增加，ACh含量减少( P<0.05)。 结论:GPR30参与了17β雌二醇减轻氯胺酮致发育期大鼠远期认知功能障碍的过程，与调节海马AChE和ACh含量有关。

目的:探讨G蛋白偶联受体75(GPR75)受体介导20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)信号通路对雄激素非依赖性前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法:体外培养PC-3雄激素非依赖性前列腺癌细胞系，未经干预为对照组，细胞转染敲减GPR75受体为shGPR75组，20-HETE干预为20-HETE组，细胞转染敲减GPR75联合20-HETE干预为shGPR75+20-HETE组。采用Western blot检测各组GPR75表达情况，采用四唑盐比色法(MTT)观察PC-3细胞增殖情况，采用Transwell检测PC-3细胞侵袭能力，采用划痕实验检测PC-3细胞迁移能力。结果:对照组GPR75蛋白表达量为(1.04±0.13)，shGPR75组为(0.42±0.03)，20-HETE组为(1.27±1.20)，shGPR75+20-HETE组为(0.68±0.07)，四组GPR75蛋白表达水平整体比较差异有统计学意义( P<0.05)。对照组细胞存活率为(76.30±10.30)%，shGPR75组为(40.33±4.60)%，20-HETE组为(88.50±12.61)%，shGPR75+20-HETE组为(54.38±6.70)%，四组PC-3细胞存活率整体比较，差异具有统计学意义( F＝30.269， P<0.05)。Transwell法结果显示，对照组侵袭能力为(107.30±15.39)个，shGPR75组为(62.30±7.20)个，20-HETE组为(123.57±18.90)个，shGPR75+20-HETE组为(80.11±10.61)个，四组侵袭能力整体比较，差异有统计学意义( P<0.05)。划痕实验显示，对照组迁移能力为(142.50±20.33)个，shGPR75组为(86.24±10.60)个，20-HETE组为(170.93±24.78)个，shGPR75+20-HETE组为(113.65±16.01)个，四组差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:20-HETE可促进雄激素非依赖性前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移，通过抑制GPR75受体可降低20-HETE的促癌作用。

目的 探讨丁酸通过激活G蛋白偶联受体41/43(GPR41/43)通路降低高血压模型大鼠血压的机制.方法 75只雄性SD大鼠随机分为假手术组(15只)和造模组(60只),采用两肾一夹方法 建立高血压大鼠模型,将成模鼠随机分为对照组(超纯水0.1 mL/kg)、丁酸高剂量组(220 mg/kg)、丁酸低剂量组(110 mg/kg)和缬沙坦组(30 mg/kg),每组15只,连续灌胃给药4周.分别在给药前后测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及心率(HR).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测大鼠胸主动脉组织中IL-6、TNF-α、eNOS的mRNA表达水平.免疫组织化学染色检测大鼠胸主动脉GPR41/43表达量.结果 给药2周,对照组大鼠SBP较假手术组显著升高(P＜0.05),丁酸高剂量组、丁酸低剂量组、缬沙坦组SBP较对照组降低,且丁酸高剂量组低于低剂量组(P＜0.05).给药4周,丁酸高剂量组较丁酸低剂量组SBP明显降低(P＜0.05);给药前后各组大鼠HR差异均无统计学意义(P＞0.05).给药后丁酸高剂量组、丁酸低剂量组eNOS蛋白和mRNA表达量较对照组增加,IL-6、TNF-α蛋白及mRNA表达量均降低(P＜0.05).免疫组织化学染色显示,大鼠胸主动脉组织的GPR41/43表达较对照组增加,且高于缬沙坦组(P＜0.05).结论 丁酸对高血压大鼠有明显的降压作用,可能与激活GPR41/43通路增加血管舒张,抑制炎性因子表达有关.

花生四烯酸(arachidonic acid,AA)可通过环氧合酶和脂氧合酶代谢途径生成白三烯类、前列腺素类和血栓素类等物质[1]. 近年研究发现,AA经过细胞色素P450(cytochrome P450, CYP)代谢途径中的表氧化酶作用可生成环氧二十碳四烯酸( epoxyeico-satrienoic acids, EETs),经过羟化酶作用生成羟基二十碳四烯酸( hydroxyeicosatetraeonic acids , HETEs ) ,如20-羟基二十碳四烯酸( 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE ). 20-HETE 作为 AA 的重要代谢产物,与高血压、脑卒中、心肌梗死、血管痉挛和血管再狭窄等疾病密切相关[2-4].

PTIP (Pax transactivation domain-interacting protein,PAXIP1)蛋白参与MLL3(lysine methyltransferase 2C,KMT2C)/MLL4(lysine methyltransferase 2B,KMT2B)组蛋白H3K4甲基转移酶复合体,促进基因的转录激活.但关于PTIP蛋白的乙酰化修饰及人宫颈癌细胞中PTIP转录激活靶基因的研究尚无报道.本研究以稳定表达SFB-PTIP蛋白的293T细胞株为对象,通过免疫沉淀和Western印迹法发现,PTIP蛋白能够发生乙酰化修饰,乙酰转移酶CBP/P300介导PTIP蛋白的乙酰化过程,CBP是主要乙酰转移酶.去乙酰化酶HDAC 1/2/3介导PTIP蛋白的去乙酰化过程.选择性HDAC1-3抑制剂MS-275促进PTIP蛋白乙酰化水平上升,且呈剂量和时间依赖性.以人宫颈癌HeLa细胞为研究对象,RNA-seq和RT-qPCR证明,CCDC121 (coiled-coil domain containing 121)和G蛋白偶联受体75 (G protein-coupled receptor 75,GPR75)是PTIP的转录激活靶基因(P＜0.01).和对照相比,MS-275介导的蛋白质乙酰化水平上升,促进基因CCDC121和GPR75的mRNA转录呈现不同程度的剂量依赖性上升(P＜0.01,P＜0.05).由此推测,MS-275有可能是通过促进PTIP蛋白的乙酰化水平,促进CCDC121和GPR75的转录.但其详细机制有待进一步研究.本研究对今后深入探讨PTIP乙酰化修饰对下游肿瘤相关基因转录的调节和功能,如肿瘤发生、进展等方面的调控机制提供了基础.

目的 分析75岁以上老年急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者外周血淋巴细胞G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)与血清可溶性ST2(sST2)水平在心力衰竭(心衰)预警中的意义.方法 选取75岁以上老年男性急性NSTEMI患者80例作为急性心肌梗死(AMI)组,平均年龄(85.4±3.2)岁;选取同期体检的健康老年男性30例作为对照组,平均年龄(84.8±2.9)岁.测定2组患者GRK2、血清sST2水平,并行超声心动图检测LVEF、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室舒张末期容积(LVEDV).AMI组患者在发病后3、6、12、24个月时进行随访.结果 AMI组患者GRK2的表达、血清sST2水平均高于对照组[3.60 vs0.72,(30.63±1.36)μg/L vs (26.87±0.55)μg/L,P＜0.01],LVEF低于对照组[(50.87±4.58)％ vs (55.15±5.87)％,P＜0.01].AMI组GRK2在发病后3、6、12、24个月随访时逐渐增高(P＜0.05,P＜0.01),sST2水平在发病后6、12、24个月随访时显著增高(P＜0.05),LVEF在发病后6、12、24个月随访时显著降低(P＜0.01).结论 75岁以上老年男性急性NSTEMI患者GRK2对AMI后心衰的预警作用优于sST2.

目的:探讨黄芩汤基于肠道菌群改善冠心病(CHD)患者以及对G蛋白偶联受体APJ的内源性配体(Apelin-13)、胃饥饿素(Ghrelin)、肥胖抑制素(Obestatin)的表达的影响.方法:选取150例CHD患者临床资料进行前瞻性研究,根据患者入院的先后顺序,采用随机数字表达法将所有CHD患者分为治疗组与对照组,每组各75例.对照组采用基础西药治疗,治疗组在基础西药治疗基础上加黄芩汤治疗.比较两组患者的疗效、Apelin-13、Ghrelin、Obestatin表达水平及肠道菌群构成情况.结果:治疗组总有效率明显高于对照组(86.67％＞72.00％),差异有统计学意义(P＜0.05),结果提示,黄芩汤可以明显的改善CHD患者的临床症状.进一步对两组患者的Apelin-13、Ghrelin,Obestatin表达情况进行测定结果发现,黄芩汤对CHD患者Apelin-13、Obestatin的下调和Ghrelin的上升均起到了加速的作用;肠道菌群构成的结果提示,黄芩汤改变CHD患者的厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)两种细菌的构成.结论:黄芩汤通过调控Apelin-13、Ghrelin、Obestatin体内表达和调控肠道菌群构成的两个角度改善CHD.

目的 评价G蛋白偶联受体30(GPR30)在17β雌二醇抑制氯胺酮致幼鼠海马神经细胞凋亡中的作用及其与磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)表达的关系.方法 清洁级健康雄性SD大鼠24只,7日龄,体重11～18 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(C组)、氯胺酮组(K组)、17β雌二醇+氯胺酮组(EK组)和GPR30抑制剂G15+17β雌二醇+氯胺酮组(G15EK组).K组腹腔注射氯胺酮75 mg/kg(生理盐水稀释至0.1 ml),EK组皮下注射17β雌二醇600μg/kg和腹腔注射氯胺酮75 mg/kg,G15EK组皮下注射GPR30抑制剂G15 300 μg/kg和17β雌二醇600μg/kg,腹腔注射氯胺酮75 mg/kg,C组腹腔注射生理盐水0.1ml.每隔24h注射1次,连续注射3d.于末次注射后24h时处死大鼠取海马,采用Western blot法检测cleaved caspase-3、ERK1/2和p-ERK1/2表达.结果 4组海马ERK1/2表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).与C组比较,K组和G15EK组海马cleaved caspase-3表达上调,p-ERK1/2表达下调(P＜0.05);与K组比较,EK组cleaved caspase-3表达下调,p-ERK1/2表达上调(P＜0.05);与EK组比较,G15EK组海马cleavedcaspase-3表达上调,p-ERK1/2表达下调(P＜0.05).结论 GPR30参与了17β雌二醇抑制氯胺酮致幼鼠海马神经细胞凋亡的过程,与上调p-ERKl/2表达有关.

目的 探讨氯胺酮对新生大鼠海马区G蛋白偶联受体30(G protein-coupled receptor 30,GPR30)表达的影响.方法 实验一:随机选取20只健康雄性SD大鼠作为空白对照组(S组,n=20),在饲养1、3、7、14 d时各取出5只处死,采用免疫组化法检测大鼠海马区GPR30阳性细胞数.实验二:10只出生7 d健康雄性SD大鼠随机分为两组,生理盐水组(C组,n=5)和氯胺酮组(K组,n=5).连续3 d腹腔注射生理盐水0.1 ml(C组)或氯胺酮75 mg/kg(K组),在末次给药后24 h处死,采用免疫组化法检测大鼠海马区cleaved caspase-3阳性细胞数,采用Western blot法检测海马区GPR30蛋白含量.结果 与1 d和3 d比较,7 d和14 d S组大鼠海马区GPR30蛋白含量明显升高(P<0.05);与7 d比较,14 d时S组大鼠海马区GPR30蛋白含量明显升高(P<0.05).与C组比较,K组海马区cleaved caspase-3阳性细胞数明显增多,GPR30蛋白含量明显降低(P<0.05).结论 氯胺酮诱导发育期大鼠海马细胞凋亡可能与GPR30表达下调有关.

目的:探讨G蛋白偶联受体75(GPR75)对20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响及机制.方法:慢病毒转染敲减H9c2心肌细胞GPR75基因表达;TUNEL法检测细胞凋亡率;RT-qPCR法检测GPR75以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的mRNA表达;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位水平;Western blot法检测GPR75、Bcl-2、Bax及细胞色素C(CytC)蛋白表达;发色底物法检测caspase-3的活性.结果:H9c2心肌细胞在mRNA及蛋白水平均表达GPR75,敲减GPR75抑制了20-HETE诱导的细胞凋亡(P<0.05);同时,敲减GPR75阻断了20-HETE诱导的Bax和CytC表达上调以及caspase-3活性增高作用(P<0.05),逆转了20-HETE诱导的Bcl-2表达下调和线粒体膜电位下降(P<0.05).结论:20-HETE通过GPR75介导引起线粒体功能紊乱,诱导H9c2心肌细胞凋亡.