目的 探究外周血蛋白酪氨酸去磷酸酶3(PTPN3)、双皮质素样激酶1(DCLK1)水平与卵巢癌(OC)患者临床病理特征及预后的关系.方法 选取2018年5月至2019年5月在张家口市第一医院收治的120例疑似OC患者作为研究对象,将60例经手术病理诊断确诊为OC的患者纳入OC组,60例经手术病理诊断确诊为良性的患者纳入良性组;选取同期同一医院体检的60例健康女性纳入对照组.根据OC患者3年随访情况,分为生存组(n=41)和死亡组(n=19).采取酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测所有研究对象外周血PTPN3、DCLK1水平.采用Kaplan-Meier法分析PTPN3、DCLK1水平与患者预后的关系,COX回归分析影响OC患者预后的危险因素.结果 与对照组相比,OC组和良性组外周血PTPN3、DCLK1水平显著升高;与良性组相比,OC组外周血PTPN3、DCLK1水平显著升高(P＜0.05).PTPN3和DCLK1水平与OC患者国际妇产科联盟(FIGO)分期、有无淋巴结转移、分化程度有关(P＜0.05).PTPN3、DCLK1高表达组患者3年内生存率低于低表达组(P＜0.05)o死亡组外周血PTPN3、DCLK1水平显著高于生存组(P＜0.05).多因素COX回归分析结果显示,分化程度、高水平PTPN3及DCLK1是影响OC患者预后的危险因素(P＜0.05).结论 OC患者外周血PTPN3、DCLK 1表达水平显著升高,且与OC患者术后3年的生存状况相关.

目的:探讨肺腺癌组织双皮质素样激酶1(DCLK1)、甘油-3-磷酸脱氢酶2(GPD2)、人线粒体转录终止因子3(hMTERF3)表达与临床病理特征及预后的关系.方法:选择2017年6月至2020年6月新疆医科大学第一附属医院胸外科收治的125例肺腺癌患者,取手术切除的癌组织以及癌旁组织(距离癌组织5 cm以上).采用免疫组化法检测癌组织以及癌旁组织的DCLK1、GPD2、hMTERF3表达.分析DCLK1、GPD2、hMTERF3表达与肺腺癌患者临床病理特征的关系.采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线分析不同DCLK1、GPD2、hMTERF3表达肺腺癌患者3年总生存率(OS)、无进展生存率(PFS).结果:癌组织DCLK1、GPD2、hMTERF3阳性表达率均高于癌旁组织(P＜0.05).低分化,TNM分期ⅢA期,淋巴结转移肺腺癌组织DCLK1、GPD2、hMTERF3阳性表达率高于中高分化、TNM分期Ⅰ、Ⅱ期、无淋巴结转移肺腺癌组织(P＜0.05).DCLK1、GPD2、hMTERF3阳性表达肺腺癌患者3年OS率、3年PFS率低于DCLK1、GPD2、hMTERF3阴性表达肺腺癌患者(P＜0.05).结论:肺腺癌组织中DCLK1、GPD2、hMTERF3阳性表达率升高,且与肺腺癌恶性病理特征和短期不良预后有关.

目的:探讨宫颈癌患者血清微小RNA-195(miR-195)、双皮质素样激酶1(DCLK1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)水平与临床病理特征及预后的相关性.方法:选取宫颈癌患者72例为观察组,同期体检健康女性60例为对照组,比较两组血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag表达水平.采用Spearman法分析宫颈癌患者血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag与临床病理特征的相关性,随访3年,记录患者生存情况.采用Cox回归模型分析宫颈癌患者预后的影响因素.结果:观察组血清DCLK1、SCC-Ag水平较对照组升高,miR-195水平较对照组下降(均P＜0.05).血清miR-195水平与淋巴结转移、国际妇产科联盟(FIGO)分期、肿瘤分化程度呈负相关,DCLK1水平与FIGO分期、肿瘤分化程度呈正相关,SCC-Ag水平与肿瘤分化程度、肿瘤直径呈正相关(均P＜0.05).miR-195高表达患者3年生存率高于低表达患者,DCLK1、SCC-Ag高表达患者3年生存率低于低表达患者(均P＜0.05).FIGO分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径及血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag水平是宫颈癌患者预后的独立影响因素(均P＜0.05).结论:宫颈癌患者血清DCLK1、SCC-Ag水平升高,miR-195水平降低,三者与临床病理特征和预后有关,是宫颈癌患者预后的独立影响因素.

目的 分析中晚期宫颈癌患者血清人附睾蛋白4(HE4)、胸苷激酶1(TK1)、双皮质素样激酶1(DCLK1)变化及其与化疗效果的关系.方法 收集2020年1月至2023年1月于郑州大学第一附属医院接受化疗的215例中晚期宫颈癌患者的病历资料,根据纳入患者的化疗效果将其分为良好组和不良组,其中良好组疗效评估结果为完全缓解(CR)与部分缓解(PR),共173例,不良组疗效评估结果为稳定(SD)与进展(PD),共42例.比较两组血清HE4、TK1、DCLK1水平等临床资料,分析中晚期宫颈癌患者血清HE4、TK1、DCLK1水平与化疗效果的关系.结果 良好组临床分期为Ⅱ期比例、高分化比例、无淋巴结转移比例均高于不良组,肿瘤最大直径以及血清HE4、TK1、DCLK1水平均低于不良组,差异均有统计学意义(P<0.05);经logistic多因素分析显示,肿瘤的临床分期达到Ⅳ期、分化程度为中低分化、淋巴结转移以及血清HE4、TK1、DCLK1水平升高均为影响中晚期宫颈癌患者化疗效果的独立因素(P<0.05);经Spearman相关性分析显示,中晚期宫颈癌患者临床分期、淋巴结转移以及血清HE4、TK1、DCLK1水平与其化疗效果成负相关,分化程度与其化疗效果成正相关(P<0.05).结论 中晚期宫颈癌患者临床分期越晚、分化程度越差、临床转移以及HE4、TK1、DCLK1水平越高,越不利于患者的化疗,上述指标对其预后均具有一定预测价值.

目的 检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清双皮质素样激酶1(dou-blecortin-like kinase 1,DCLK1)和整合素α5(integrin alpha5,ITGA5)水平并讨论二者与临床病理特征及预后的关系.方法 选取2017年6月1日至2020年7月1日在我院收治的116例NSCLC患者(NSCLC组)作为研究对象,收集同期100例健康受试者作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测NSCLC组和对照组受试者血清中DCLK1和ITGA5的水平;根据预后情况将患者分为生存组和死亡组,ROC曲线分析血清DCLK1、ITGA5的水平对NSCLC患者3年发生死亡的预测价值,多因素Cox回归分析影响NSCLC患者发生死亡的因素.结果 NSCLC组患者血清DCLK1、ITGA5的水平高于对照组(P＜0.05);不同吸烟史、TNM分期、分化程度、肿瘤直径以及淋巴结转移的NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05);死亡组患者血清DCLK1、ITGA5的水平均高于生存组(P＜0.05);血清DCLK1、ITGA5单独及联合预测患者发生死亡的AUC 分别为 0.895(95％CI=0.824～0.944)、0.828(95％CI=0.747～0.892)、0.926(95％CI=0.862～0.966);DCLK1、ITGA5及淋巴结转移是影响NSCLC患者发生死亡的独立危险因素(P＜0.05).结论 NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平异常升高,二者的表达水平与NSCLC患者临床病理特征和不良预后有关.

目的:研究双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)对胃癌干细胞生物学特性的作用,初步探讨其可能的作用机制.方法:无血清培养液悬浮培养胃癌干细胞,用DCLK1抑制剂DCLK1-IN-1靶向抑制胃癌干细胞中DCLK1活性.用Western blot法检测胃癌干细胞中DCLK1、干性相关蛋白(SOX2和OCT4)、细胞增殖相关蛋白(cyclin D1和c-MYC)、耐药相关蛋白(ABCG2和TOP2A)、上皮-间充质转化相关蛋白(E-cadherin、vimen-tin和Snail)和PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平.用CCK-8法测定DCLK1对胃癌干细胞活力及耐药的影响;用甲基纤维素成球法测定DCLK1对胃癌干细胞自我更新的影响.用细胞划痕实验和Transwell实验测定DCLK1对胃癌干细胞迁移和侵袭功能的影响.结果:胃癌干细胞中DCLK1及干性相关蛋白SOX2和OCT4表达明显高于亲本细胞(P＜0.01).DCLK1抑制组胃癌干细胞的增殖、耐药、迁移和侵袭能力明显低于Sphere细胞组(P＜0.01).DCLK1抑制组细胞增殖相关蛋白c-MYC和cyclin D1表达下调,耐药相关蛋白TOP2A和ABCG2表达下调,上皮标志物E-cadherin表达上调,间充质标志物vimentin和Snail表达下调,PI3K/AKT/mTOR相关蛋白表达及其磷酸化水平降低(P＜0.01).结论:DCLK1在胃癌干细胞中高表达,它可能通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进胃癌干细胞增殖、耐药、侵袭和迁移.DCLK1可作为靶向胃癌干细胞的潜在靶点.

目的:研究双皮质素样激酶1(doublecor-tin-like kinase 1,DCLK1)在肝癌中发生转录上调的机制,为肝癌的防治提供新思路.方法:实时定量PCR检测表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)是否通过表皮生长因子受体(epider-mal growth factor receptor,EGFR)上调肝癌细胞中DCLK1 mRNA的表达,Western blot检测EGF是否通过EGFR上调肝癌细胞中DCLK1蛋白的表达,免疫组织化学染色检测EGFR和DCLK1在39例人肝癌组织中的表达情况.结果:EGF孵育肝癌细胞HepG2和Huh-7后,DCLK1 mRNA和蛋白的表达明显上调(P<0.05,P<0.01),而基因敲减EGFR可以显著抑制EGF诱导的DCLK1 mRNA和蛋白的上调(P<0.01).在人肝癌标本中,EGFR和DCLK1表达呈显著的正相关(r=0.669 6).结论:EGFR参与了肝癌组织中DCLK1的转录调控.

目的 探讨血清双皮质素样激酶1(DCLK1)、可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)对前列腺癌根治术患者预后的评估.方法 选取2016年6月至2019年6月在右江民族医学附属医院行前列腺癌根治术的80例患者作为研究组,另选取同期80例健康体检者作为对照组;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清DCLK1、sTim-3水平;分析血清DCLK1、sTim-3与前列腺癌根治术患者病理临床特征及预后的关系.结果 研究组血清DCLK1、sTim-3水平显著高于对照组(P<0.05).血清DCLK1、sTim-3水平呈正相关(P<0.05).二者与PSA水平、Gleason评分均呈正相关(P<0.05).血清DCLK1、sTim-3表达水平与PSA水平、Gleason评分以及TNM分期有关(P<0.05).预后死亡组血清DCLK1、sTim-3水平显著高于预后生存组(P<0.05).DCLK1和sTim-3高表达患者生存率低于低表达患者.根据Cox回归分析表明,DCLK1、sTim-3高表达是影响前列腺癌根治术患者预后的危险因素(P<0.05).根据ROC曲线得知,二者联合预测前列腺癌根治术患者预后的AUC优于DCLK1、sTim-3各自单独预测.结论 DCLK1、sTim-3在前列腺癌患者血清中显著升高,二者联合可以更好对前列腺癌根治术患者预后进行评估.

目的 研究双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)的敲除对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其潜在的作用机制.方法 使用CRISPR/ Cas9基因编辑技术靶向敲除食管鳞癌细胞(Kyse450,Kyse70)的DCLK1基因.通过细胞划痕实验和Transwell实验评估DCLK1敲除对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响.Western blotting法检测DCLK1敲除细胞系中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关转录因子的表达变化.通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atla,TCGA)数据库进一步分析食管鳞癌患者(n=95)中DCLK1表达和EMT相关转录因子之间的相关性.结果 CRISPR/ Cas9基因编辑技术能够有效地敲除食管鳞癌细胞系DCLK1基因并影响其表达.DCLK1缺失显著抑制食管鳞癌细胞的体外迁移和侵袭能力(P＜0.05),并上调上皮标志物E-cadherin的表达,下调间质标志物如Vimentin、ZEB1、Slug和Snail的表达(P＜0.05).另外TCGA数据库分析显示食管鳞癌患者中DCLK1与EMT相关转录因子存在相关性.结论 DCLK1敲除可通过抑制EMT进程影响食管鳞癌细胞的迁移和侵袭.

目的 观察在结肠癌中Wnt-β-连环蛋白(β-catenin)通路的激活是否调节上皮细胞黏附分子(EpCAM)表达,并分析XAV939对结肠癌相关标志物表达的影响.方法 激活Wnt-β-catenin 信号传导后,通过荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)确定相关基因相对表达水平.构建小鼠结肠癌模型,腹腔注射XAV939和/或5-Fu处理1周后,通过蛋白印迹法检测结肠组织中相关分子表达.应用SPSS 24.0统计软件分析,以独立样本t检验进行组间比较,以配对t检验进行组内比较.结果 与对照组比较,LiCl能够显著激动Wnt-β-catenin信号传导通路相关基因的表达,TACSTD1、DKK1、BAMB Ⅰ、CCND1和MYC基因水平均显著升高,分别上升1.20、2.44、4.34、2.57、1.58倍(t=12.179、20.661、54.378、19.384、20.341,P＜ 0.05).ZnCl2处理则能显著抑制HCT116细胞中TACSTD1和CCND1的表达(tTACSTD1=36.467、9.682,tCCND1=16.130、17.003,P＜O.05),分别下调50.06％、34.38％.而在APC基因缺失细胞中,ZnCl2对TACSTD1和CCND1的抑制作用被逆转.XAV939和XAV939+5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理能够显著上调HCT116细胞中Axin相对表达水平,较对照组的升高15.97倍和17.20倍(t=19.502、18.236,P＜0.05);同时β-catenin、EpCAM、端粒反转录酶(TERT)和双皮质素和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶样-1(DCAMKL-1)的表达水平分别下调0.75和0.72倍、0.68和0.25倍、0.74和0.73倍、0.27和0.34倍(tβ-catenin=20.412、22.862,tEpCAM=26.336、27.111、82.711,tTERT=19.636、22.787、23.678,tDCAMKL-1=81.637、64.814,P＜0.05).结论 XAV939通过阻断Wnt-β-catenin信号传导下调β-catenin、靶基因EpCAM和CSC其他相关因子表达以抑制肿瘤细胞增殖,以促进结肠癌预后.