目的:了解舟山海岛地区蜱类所携带的病原体多样性及其基因同源性。方法:2020年4—11月，采用布旗法收集舟山海岛地区发热伴血小板减少征病例居住地周围环境中的游离蜱，采用畜体检查法采集家畜身上的寄生蜱。蜱样本提取RNA或DNA进行荧光RT-PCR检测，以嗜吞噬细胞无形体、立克次体、查菲埃里克体、新型布尼亚病毒、汉坦病毒、汉城病毒、沃尔巴克体、山羊无形体为引物进行PCR扩增初筛。扩增序列测序后进行同源性分析，以邻接法构建系统进化树。结果:共采集蜱样本99只，其中游离蜱样本39只，寄生蜱样本60只。在蜱样本中检出嗜吞噬细胞无形体、立克次体、沃尔巴克体和山羊无形体核酸阳性。此次检出的沃尔巴克体与日本报道的沃尔巴克体（AB025965）同源性为98.70%；立克次体与中国云南立克次体03（KY433580）、日本立克次体LA16同源性为99.83%；嗜吞噬细胞无形体有2个进化分支：一个进化分支与安徽桐城（MK045683）及韩国济州岛（GU064903）的嗜吞噬细胞无形体同源性为100.00%，另一个进化分支与安徽金寨的嗜吞噬细胞无形体（MK045694）同源性为99.70%。结论:舟山海岛地区是嗜吞噬细胞无形体、山羊无形体和日本立克次体的自然疫源地，暴露居民存在感染风险。

人粒细胞无形体病（HGA）是一种经蜱虫传播，因嗜吞噬细胞无形体侵染人体末梢血中性粒细胞引起的新发自然疫源性疾病，临床表现为发热，白细胞、血小板减少和多器官功能受损 [1]。2006年，安徽省芜湖市出现我国首例HGA患者 [2]。此后，相继在湖北省、浙江省、河南省、山东省、山西省及江苏省等地出现该病的病例报道。现将2022年7月甘肃省天水市第二人民医院收治的1例HGA患者的临床表现、救治经过和愈后随访等内容进行整理分析，以期提升医务人员对HGA的认识，增强诊断及治疗该病的能力。

本研究报道1例人嗜粒细胞无形体病合并噬血细胞综合征患者，以发热为首发症状，伴有血小板减少，多发淋巴结肿大和血清铁蛋白异常增高等表现，最终经嗜吞噬细胞无形体核酸、抗体检测，骨髓穿刺涂片等检查确诊，予以口服多西环素，治疗后患者病情缓解。

嗜吞噬细胞无形体以蜱虫为传播媒介，专性寄生于啮齿动物、反刍动物、鹿、马以及人类。当感染嗜吞噬细胞无形体的蜱虫吸食人类血液时，会将嗜吞噬细胞无形体传播至人体内，导致无形体病。随着人类户外活动的增加，蜱虫和人类的接触机会增多，患无形体病的概率也相应增大。无形体病确诊患者经强力霉素治疗大多可以痊愈，但是免疫力低下的患者有并发癫痫、肾衰竭甚至死亡的风险。全面了解嗜吞噬细胞无形体的致病机制，可以为重症患者的治疗提供新的治疗策略。因此，本综述简介了嗜吞噬细胞无形体致病相关蛋白质，然后从干扰细胞骨架重塑、抑制宿主细胞凋亡、固有免疫应答失调三个方面总结了该病原体致病机制的研究现状，并提出需要解决的关键问题。

目的:建立及优化检测立克次体目中7种重要病原菌的TaqMan-探针实时荧光定量PCR（qPCR）方法，可同步检测并明确感染类型。方法:根据普氏立克次体、莫氏立克次体和斑点热群立克次体 ompB基因、恙虫病东方体 groEL基因、查菲埃立克体16S rRNA基因、嗜吞噬细胞无形体 gltA基因和贝氏柯克斯体 com1基因序列合成引物和探针，优化反应体系及反应程序至同一方案，对该方法灵敏度、特异性和重复性等进行评价，并使用该方法对模拟样本和实际样本进行检测。 结果:7种病原菌标准曲线的 Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系（均 R2>0.990 0），所建立方法最低检测限均为1×10拷贝数/μl且具有良好的特异性。96份蜱虫核酸提取物样本中，1份样本检出贝氏柯克斯体，3份样本检出斑点热群立克次体；80份不明原因发热患者血标本DNA中，1份样本检出恙虫病东方体，2份样本检出斑点热群立克次体。 结论:本研究基于TaqMan-探针qPCR方法，将7种病原菌反应体系及反应程序优化至同一方案，克服目前不同立克次体目病原菌采用不同的反应体系和反应程序的缺点，可将临床样本中立克次体目的7种重要病原菌精确定位检测至种，明确感染病原菌类型并缩短检测时间，有助于对患者的精准诊治。

目的 通过对铜陵市鼠形动物病原体感染情况的调查,为本地鼠媒传染病控制提供科学依据.方法 2022 年 1 月至 12 月,在安徽省铜陵市枞阳县、义安区、铜官区和郊区进行鼠类监测和标本采集,利用荧光定量PCR方法对其脾、肝、脾、肺组织中汉坦病毒、大别班达病毒、嗜吞噬细胞无形体和致病性钩端螺旋体等4种病原体进行检测、分析.结果 共捕获234 只鼠形动物,病原总检出率为4.27%,汉坦病毒和致病性钩端螺旋体检出率均为 2.14%;汉坦病毒在黄胸鼠和褐家鼠中检出率为 3.77%和 1.59%,在不同生境中,重点行业鼠形动物中汉坦病毒检出率为 6.67%,农村居民区为 2.15%;致病性钩端螺旋体在北社鼠、褐家鼠和黄胸鼠中检出率依次为 8.33%、4.76%和 0.94%,在不同生境中,农田耕地鼠形动物中致病性钩端螺旋体检出率为6.25%、农村居民区为 2.15%.结论 铜陵市鼠形动物中存在病原体感染,需加强鼠类防制及鼠媒传染病控制,以降低人群感染风险.

目的 了解西藏自治区亚东县西藏血蜱携带微生物群落的情况及主要病原体无形体的分型.方法 2022年5月在亚东县采集寄生于牦牛身上的蜱虫样本141只.根据硬蜱线粒体16SrDNA基因扩增序列进行分子鉴定以确定蜱种.采用IlluminaNovaseq6000平台对西藏血蜱进行高通量测序,将测序得到的原始数据处理后对其进行组装、基因预测、丰度分析和分类学预测.利用巢式PCR扩增无形体的16SrDNA基因片段并测序及进行序列的遗传进化分析.结果 121只成蜱样本鉴定为西藏血蜱.非冗余数据集经NCBI-NR数据库比对进行物种注释后,最常见的微生物种类是真核生物(19.78％)和细菌(13.54％).在细菌中,优势门分别是变形杆菌门、拟杆菌门和厚壁菌门;优势属分别是无形体属、锥虫属、冷杆菌属和立克次体属;优势种分别是嗜吞噬细胞无形体、泰勒虫和斑点热群立克次体.无形体的系统发育树与绵羊无形体遗传距离最近,具有较高的同源性.结论 西藏自治区亚东县地区优势蜱种为西藏血蜱.无形体的主要分型为绵羊无形体.当地人畜暴露在多种蜱传病原体中,存在潜在蜱传疾病的威胁,应针对性加强对蜱的监测和预防控制工作.

[背景]鼠传疾病是对人类危害较大的一种人兽共患病,全球化使得鼠传疾病流行区域不断扩大,出现了多种新发鼠传疾病的发生及旧传染病的复燃.[目的]调查新疆阿勒泰地区常见的鼠传致病菌在啮齿动物中的流行状况,为当地自然疫源性疾病防控提供科学依据.[方法]采用夹夜法捕获啮齿动物,无菌收集其脾脏和肾脏组织,提取基因组DNA.应用TaqMan探针法的荧光定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测巴尔通体(Bartonella spp.)、问号钩端螺旋体(Leptospira interrogans)、恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi)、莫氏立克次体(Rickettsia mooseri)、嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)和土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis)6 种常见的鼠传致病菌.采用 16S rRNA 基因的通用引物进行常规 PCR 扩增后,应用Illumina测序和Nanopore测序进一步检测致病菌,同时对脾脏组织进行巴尔通体体外分离培养.比较qPCR、16S rRNA基因测序和分离培养的结果.[结果]共捕获啮齿动物 8 种 66 只,其中,乌拉尔姬鼠(Apodemus uralensis)31 只,占捕获总数的 46.97%,其余为褐家鼠(Rattus norvegicus)、小家鼠(Mus musculus)等.qPCR检测常见的鼠传致病菌感染率为巴尔通体 31.80%(21/66)、问号钩端螺旋体 1.50%(1/66)、恙虫病东方体 1.50%(2/66)、莫氏立克次体 3.00%(1/66)和土拉弗朗西斯菌13.60%(9/66),未检出嗜吞噬细胞无形体.16S rRNA基因Illumina测序分析通过质控的 23 份样品检测出致病菌,以巴尔通体为主;16S rRNA基因Nanopore测序分析通过质控的 11 份样品检测出巴尔通体,其他 5 种常见的鼠传致病菌未检出.有 11 份脾脏组织分离培养出巴尔通体,感染率为16.67%(11/66).[结论]新疆阿勒泰地区的啮齿动物可携带巴尔通体等多种鼠传致病菌,应关注并加强该地区相关传染病的防治工作.qPCR、细菌分离培养、16S rRNA基因测序 3 种检测方法可互相补充,更全面地了解当地啮齿动物携带致病菌的状况.

目的 评估血细胞分析仪Sysmex XT-4000i体液(body fluid,BF)模式进行脑脊液细胞计数的性能. 方法收集2015年6~12月山东省立医院住院患者脑脊液标本142份,用XT-4000i进行细胞计数和分类,并与人工显微镜(人工灌板和细胞离心染色)计数进行方法学比较.结果 XT-4000i和人工显微镜计数之间白细胞计数(y=1.17x+3.21,n=118, r2=0.98)、单个核细胞计数(y=0.81x+13.61,n=101,r2=0.88)、多个核细胞计数(y=0.82x+5.15,n=101,r2=0.88)、红细胞计数(y=1.01x+146.40,n=62,r2=0.99)均呈高度相关.XT-4000i检测的研究参数高荧光强度细胞(HF-BF)水平与显微镜下查到大细胞(吞噬细胞或恶性细胞等)具有相关性(y=0.54x+3.31,n=101,r2=0.27,P<0.001),真阳性率是13.9%,真阴性率是96.9%.XT-4000i检测的另一研究参数嗜酸性粒细胞(EO-BF)水平与人工显微镜方法的相关性无统计学意义(P>0.05),真阳性率是9.8%,真阴性率是80.0%.XT-4000i的白细胞、单个核细胞、多个核细胞和红细胞计数均表现出良好的精密度(CV≤30%).白细胞计数和红细胞计数具有良好的携带污染率(carry-over≤0.3%)和线性分析(r2=0.99).结论 XT-4000i体液模式的准确度和精密度良好,可用于日常脑脊液细胞计数.高荧光强度细胞水平对脑脊液中的大细胞具有一定的提示预测作用.

目的 了解满洲里口岸地区蜱传、鼠传疾病病原体携带情况.方法 2016年在中国-俄罗斯边境满洲里口岸地区采集蜱和鼠,采用PCR和RT-PCR法检测莱姆病螺旋体(Borrelia burgdorferi)、嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)、巴贝西原虫(Babesia spp.))、斑点热群立克次体(spotted fever group Rickettsiae,SFGR)、汉坦病毒(Hantaan virus)和鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis).结果 共采集到132只蜱,斑点热群立克次体检出率为37.88％(50/132),嗜吞噬细胞无形体检出率为0.76％(1/132),莱姆病螺旋体检出率为25％(33/132),中华革蜱中同时检测到斑点热群立克次体和莱姆病螺旋体,存在复合感染的情况,未检出巴贝西原虫和汉坦病毒.17只鼠中,斑点热群立克次体检出率为41.18％(7/17),莱姆病螺旋体检出率为5.88％ (1/17),未检出鼠疫耶尔森菌、嗜吞噬细胞无形体、汉坦病毒和巴贝西原虫.结论 满洲里口岸地区蜱、鼠样本中检出多种病原体,应有针对性地加强当地蜱、鼠及其传播疾病的监测和防控.