目的 建立超高效液相色谱串联—四极杆—静电场轨道阱质谱技术(ultra-performance liquid chromatogra-phy-linear ion trap quadrupole-Orbitrap-mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap-MS)对铁皮石斛(Dendrobiumoffi-cinale Kimura&Migo)水提物石油醚、乙酸乙酯、正丁醇3种萃取组分进行定性表征的方法.方法 提取铁皮石斛水提物并依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,旋蒸浓缩后,得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取组分.样品经UPLC-Q-Orbitrap-MS分析,根据元素组成、分子量、质荷比、离子碎片等确定化合物信息并推导裂解规律,通过与文献、MzCloud、MzVault、PudChem、本地数据库比对确定鉴定结果.结果 在正负离子模式下共鉴定出化合物62种,包括黄酮类成分20种,联苄类成分6种,羧酸及其衍生物6种,脂肪酸及其衍生物6种,酚类成分4种,氨基酸及其衍生物3种,糖类成分2种,生物碱类、苯丙素、蒽醌、萜类化合物各1种,其他类成分3种,还检测到8种含量较高、质谱信号较强的未知成分.其中水提石油醚萃取物中鉴定出化合物7种,乙酸乙酯萃取物中鉴定出化合物36种,正丁醇萃取物中鉴定出化合物48种.通过与文献比对,62种化合物中有7种化合物为首次从铁皮石斛中提取得到.结论 该方法可快速有效分析铁皮石斛中多种化学成分,可为铁皮石斛质量控制及药效物质基础研究提供参考.

目的:优选消癌平胶囊的最佳水提醇沉工艺。方法:采用正交试验法，以通关藤苷G含量和干浸膏率为指标，考察煎煮次数、煎煮时间、加水量对消癌平胶囊水提取工艺的影响；考察醇沉浓度、相对密度、静置时间对其醇沉工艺的影响。结果:优选的水提工艺为加6倍量的水煎煮3次，每次1.5 h；优选的醇沉工艺为水提液浓缩至相对密度为1.15(60 ℃)，冷却后加入乙醇，使含醇量为70%，静置12 h，除去沉淀。结论:优选的水提醇沉工艺稳定可行、重现性好，可为消癌平胶囊的提取纯化提供参考。

目的:基于网络药理学方法研究白花蛇舌草抗肝纤维化的作用机制。方法:检索TCMSP与Uniprot数据库，筛选白花蛇舌草有效成分及靶基因。通过GeneCards及OMIM数据库筛选肝纤维化的疾病靶基因，使用Cytoscape 3.8.2软件构建“疾病-成分-靶点”网络。通过STRING数据库构建PPI网络，借助Cytoscape 3.8.2软件筛选核心靶点，并对核心靶点进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。对分析结果进行实验验证。腹腔注射40%四氯化碳橄榄油溶液制备肝纤维化大鼠模型，将造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组及白花蛇舌草组，每组10只。另以10只健康大鼠为空白对照组。白花蛇舌草组灌胃白花蛇舌草水提液2.7 g/kg，空白对照组及模型组灌胃等体积的蒸馏水，1次/d，连续4周。观察各组大鼠肝组织病理学变化及血清GPT、GOT、Alb水平；ELISA法检测外周血IL-6、IL-1β、TGF-β1水平；采用Western blot法检测PI3K、Akt、HIF-1α、VEGF蛋白表达。结果:获得白花蛇舌草治疗肝纤维化的有效成分5个，有效靶点118个。度值较高的有效成分为豆甾醇、β-谷甾醇、槲皮素等；度值较高的作用靶点为VEGF、EGFR、HIF-1α、IL-6。PPI网络中核心基因为HIF-1α、IL-6等；GO功能富集分析显示，可能影响RNA转录、蛋白结合等过程；KEGG通路富集分析显示，显著富集的通路为癌症通路、乙型肝炎通路、PI3K/Akt、HIF-1通路等。动物实验结果显示，与模型组比较，白花蛇舌草组肝脏组织病理学明显改善，白花蛇舌草组大鼠血清GPT、GOT、IL-6、IL-1β、TGF-β1水平降低（ P<0.01），Alb水平升高（ P<0.01），肝组织中PI3K、Akt、HIF-1α、VEGF蛋白表达降低（ P<0.01）。 结论:白花蛇舌草可通过作用VEGF、EGFR、HIF-1α与IL-6靶点，调控PI3K/Akt、HIF-1通路等发挥抗肝纤维化作用，并具有抗炎、抗血管新生、抗肿瘤等生物学功能。

目的:通过对3种不同提取方式获得的芍藤方配方颗粒进行药效学研究，探索芍藤方的免疫抑制作用，优选提取工艺。方法:分别采用水提取、70%乙醇提取及水提醇沉工艺制备芍藤方提取物。将30只非肥胖型糖尿病（NOD）小鼠按随机数字表法分为芍藤方全方水提组（工艺一组）、芍藤方70%乙醇提取组（工艺二组）、芍藤方水提醇沉组（工艺三组）、模型组和羟氯喹组，每组6只。另设6只Balb/C小鼠为正常对照组。工艺一、二、三组灌胃相应芍藤方提取物16 g/kg，羟氯喹组灌胃硫酸羟氯喹60 mg/kg，正常对照组和模型组灌胃等体积去离子水，1次/d，连续灌胃4周。末次给药后取材，计算脾脏指数和颌下腺指数，采用HE染色观察颌下腺组织病理形态，采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α、脱氢表雄酮（DHEA）、雌二醇和IgG水平。结果:与模型组比较，各给药组脾脏指数降低（ P<0.01或 P<0.05），工艺三组和羟氯喹组颌下腺指数升高（ P<0.01）；各给药组颌下腺组织病理评分降低（ P<0.01或 P<0.05），血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IgG水平降低（ P<0.01或 P<0.05），DHEA水平升高（ P<0.01或 P<0.05）；工艺一组、工艺三组和羟氯喹组血清雌二醇水平升高（ P<0.01或 P<0.05）。 结论:芍藤方可有效降低NOD小鼠血清炎症因子水平并抑制免疫，以芍藤方水提醇沉工艺的提取物药效更优，为其最佳提取工艺。

目的:研究红参水提液对运动小鼠的抗疲劳作用及其机制。方法:制备每1 ml水提液相当于0.022 g红参药材的水提液。将小鼠按体重分为空白对照组及红参水提物低、中、高剂量组，每组12只。红参水提物低、中、高剂量组灌胃红参水提物15、30、45 ml/kg，空白对照组灌胃等体积蒸馏水，1次/d，连续灌胃30 d。测定小鼠负重游泳时间、肌肉组织ATP酶活力、血清SOD和MDA水平、血清BUN含量及LDH活力、肝脏肝糖原含量及运动后血乳酸含量等指标。结果:与空白对照组比较，红参水提液高剂量组负重游泳时间[(661.35±245.62)s比(412.23±141.35)s]延长( P<0.05)；肌肉组织Na ＋-K ＋-ATP酶[(4.73±1.21)U/mg比(3.43±1.07)U/mg]和Ca 2＋-Mg 2＋-ATP酶活力[(4.87±1.54)U/mg比(3.98±1.12)U/mg]升高( P<0.05)；血清SOD水平[(102.54±18.73)U/ml比(70.37±8.69)U/ml]升高( P<0.05)，MDA水平[(8.36±0.55)nmol/ml比(15.73±1.18)nmol/ml]降低( P<0.05)；血清LDH活力[(5 718.72±716.35)U/L比(4 824.91±532.67)U/L]升高( P<0.01)，肝脏肝糖原量[(6 149.74±1 236.65)mg/100 g比(4 696.27±555.63)mg/100 g]升高( P<0.05)；红参水提液中、高剂量组血乳酸含量[(1.86±0.52)mmol/L、(1.78±0.46)mmol/L比(2.89±1.44)mmol/L]降低( P<0.05)，且血乳酸曲线下面积[(89.79±17.81)及(84.83±14.87)比(105.25±22.44)]降低( P<0.05)。 结论:红参水提液可延长疲劳小鼠负重游泳时间，增加肝糖原积累，降低血清乳酸含量，并通过抗氧化作用增强机体对运动负荷的适应能力，发挥抗疲劳作用。

目的 多糖是枸杞中主要的活性成分,各产地间枸杞多糖的结构和含量均有差异.目前枸杞多糖的质量控制方法大多都通过单糖组成构建指纹图谱,但仅通过单糖指纹图谱对枸杞多糖进行质量控制,并不能系统地对不同产地的枸杞多糖进行质量控制.因此,我们在单糖指纹图谱的基础上,利用Needs甲基化法确定枸杞多糖的糖残基连接方式,建立Needs甲基化法枸杞多糖指纹图谱,实现对不同产地枸杞的质量控制.方法 通过水提醇沉法获得枸杞多糖,并采用Needs甲基化、完全酸水解、硼氢化钠还原及乙酰化等方法结合GC-MS测定枸杞多糖的糖残基连接方式.结果 将18批枸杞多糖的糖残基连接方式色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004版)构建出指纹图谱,并结合多种化学计量法评价不同产地间枸杞多糖的差异.相似度计算结果发现,除西藏自治区三批枸杞多糖相似度0.551-0.569,其余15批样品相似度均0.929以上.糖残基连接方式色谱图共标定了16个共有峰,指认了其中10个共有峰,分别为T-Arap、T-Araf、T-Xylp、1,2-Arap、1,3-Rhap、1,5-Araf、T-Glcp、T-Galp、1,4-Glcp、1,6-Galp.HCA、PCA和PLS-DA分析结果将18批次不同产地的枸杞多糖分为3类,并筛选出了3个标志性成分,分别为T-Araf、1,5-Araf和T-Glcp,以此来判断不同产地间枸杞多糖的差异性.结论 首次建立了18批枸杞多糖的Needs甲基化法指纹图谱,为枸杞多糖质量控制提供实验数据参考,进一步证明了多糖在中药质量控制中的作用.

目的 优选黄精膏的水提工艺,研究其体外抗氧化活性.方法 采用主客观组合赋权结合响应面法、HPLC法,以料液比、提取时间、提取次数为考察因素,6-姜辣素、总多糖的含量及干浸膏得率为评价指标,优化黄精膏的水提工艺,并评价最佳工艺下黄精膏水提液的体外抗氧化活性.结果 黄精膏的最佳水提工艺为料液比1∶8,提取次数3次,提取时间1.5 h,该条件下黄精膏水提液的综合评分为44.974,预测结果的平均得分为49.881,相对误差为3.494％,与预测值的得分接近一致;DPPH自由基、羟基自由基清除率随水提液的浓度增加而增大,50 mg·mL-1黄精膏水提液对羟基自由、DPPH自由基的清除率分别为89.49％±0.02％、83.80％±0.01％.结论 优选的水提工艺稳定,合理可行,水提液具有较好的抗氧化活性,可为黄精膏药食同源产品的后续开发提供依据.

目的 设计正交试验提取二至丸中的多糖类成分并测定多糖含量,将提取物制成颗粒剂.方法 2022年9-12月采用传统的水提醇沉法提取二至丸中的多糖类成分,进行L(34)正交实验设计,探究料液比、提取温度、提取时间、提取次数对多糖9提取率的影响,优选多糖提取物的最佳提取工艺;以葡萄糖为标准,采用苯酚-硫酸法进行样品多糖含量测定;并将提取的多糖提取物进行湿法制粒.结果 探究的四个因素对多糖提取率的影响程度为:提取次数＞提取时间＞提取温度＞料液比;最佳提取工艺为:料液比1∶10(g/mL),提取温度95℃,提取时间3 h,提取次数3次;所制多糖颗粒剂质量评价结果均符合2020版《中国药典》标准.结论 该研究优化了二至丸中多糖类成分的提取工艺,为二至丸的进一步开发利用提供科学依据.

目的 基于液质联用技术对生知母-生黄柏、盐知母-盐黄柏药对水提液灌胃给药后大鼠入血成分分析,结合网络药理学预测盐炙在知母-黄柏药对治疗 2 型糖尿病的影响,并通过体外实验进行初步验证.方法 大鼠连续灌胃给药生知母-生黄柏药对、盐知母-盐黄柏药对水提液 2 次,中间间隔 1 h,末次给药 60 min后腹主动脉取血,用甲醇沉淀蛋白法处理后复溶,采用色谱柱Shim-pack GIST C18(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相A相为0.1%甲酸水,B相为0.1%甲酸-乙腈;梯度洗脱,正、负离子全扫描模式,质量扫描范围m/z 100～1 500.结合数据库二级谱图及文献,分析鉴定生知母-生黄柏、盐知母-盐黄柏药对的入血成分.检索 2 型糖尿病疾病靶点,对入血成分和疾病的交集靶点进行蛋白质互作网络分析、GO、KEGG通路富集分析,构建"入血成分-靶点"网络图,运用 AutoDock软件对筛选出的核心成分和核心靶点进行分子对接验证.验证实验以HepG2 细胞为实验对象,胰岛素联合高糖诱导胰岛素抵抗模型,CCK8 法检验盐炙前后知母-黄柏药对对细胞增殖影响,West-ern blot检测PI3K-AKT信号通路相关蛋白的表达情况.结果 生知母-生黄柏药对水提液大鼠血清中鉴定出 15 种原型成分,1 个芒果苷代谢成分.盐知母-盐黄柏药对水提液大鼠血清中鉴定出 17 个原型成分,1 个芒果苷代谢成分.盐炙后入血成分中芒果苷、小檗碱、3-异丁基戊二酸等成分含量较生品高.KEGG和GO结果显示,知母-黄柏药对治疗 2 型糖尿病可能与RNA聚合酶的转录调控、炎症反应、AGE-RAGE、PI3K-AKT、胰岛素抵抗等通路有关.细胞实验表明盐炙前后知母-黄柏药对可以上调p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、GLUT4 蛋白表达,且盐炙组效果优于生品组.结论 初步阐释了知母-黄柏药对盐炙前后入血成分,阿魏酸、小檗碱、小檗红碱、芒果苷与mTOR、SIRT1、EGFR、PPARA等可能是知母-黄柏药对盐炙后增强 2 型糖尿病治疗效果的主要成分和靶点,其机制可能是增强了PI3K-AKT等相关通路的作用,为知母-黄柏药对盐炙前后药效物质基础研究及临床应用提供重要参考.

目的 优选银杏叶最佳传统水提工艺和纯化工艺.方法 以总银杏酸转移率、总黄酮醇苷转移率和出膏率为考察指标,采用层次分析法(AHP)-熵权法确定权重系数,在单因素试验的基础上,采用正交试验优选出银杏叶的最佳水提和纯化工艺.结果 最佳水提工艺为:银杏叶饮片装量比为 1/2,加 8 倍水,提取 2 次,每次 30 min;最佳纯化工艺为:水提药液减压浓缩至相对密度 1.08,4℃静置 48 h,静置后的上层药液 2 029×g离心 5 min.结论 该方法稳定可行,能最大程度地去除有害成分总银杏酸,保留有效成分总黄酮醇苷.