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百日咳毒素、丝状血凝素和百日咳黏附素精制抗原纯度的SDS-PAGE检测方法的验证
编辑人员丨1周前
目的 采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)方法检测百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)和百日咳黏附素(pertactin,PRN)精制抗原纯度,并进行验证.方法 对样品进行SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝染色后,使用凝胶成像系统拍照并用Image Lab软件进行分析,获得样品各蛋白条带的光密度值.对建立的方法进行系统适用性、线性、准确度、重复性、中间精密度、灵敏度和耐用性验证.结果 对应 2 套分子量标准蛋白,PT、FHA和PRN精制抗原分别在10.00~50.00 μg/mL的低质量浓度范围和 50.00~600.00 μg/mL的高质量浓度范围内,蛋白浓度和对应条带光密度值之间具有良好的线性关系,相关系数(coefficient of correlation,r)≥0.99.3 种精制抗原杂质水平准确度和重复性回收率均在 80%~120%,且重复性验证相对标准差(relative standard deviation,RSD)≤10%;抗原水平准确度和重复性回收率均在90%~110%,重复性验证RSD≤10%;灵敏度 12.50 μg/mL的回收率均在 80%~120%,RSD≤10%;中间精密度验证RSD≤10%.结论 建立的测定PT、FHA和PRN精制抗原纯度的SDS-PAGE法,其系统适用性、准确度、重复性、中间精密度和灵敏度均良好,可用于以上精制抗原的纯度检测.
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编辑人员丨1周前
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经典名方沙参麦冬汤颗粒制备工艺及质量标准研究
编辑人员丨1周前
目的 制备经典名方沙参麦冬汤颗粒,并建立沙参麦冬汤颗粒的质量标准.方法 以熵权法及正交实验优选沙参麦冬汤回流提取工艺,与古法煎煮工艺进行对比,并进一步筛选颗粒的成型工艺.采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatogra-phy,HPLC)建立沙参麦冬汤颗粒的指纹图谱和甘草苷、甘草酸的含量测定方法,并考察基准样品(煎液、冻干粉)、颗粒剂生产各环节(提取液、中间体、成品)指纹图谱的相似度和甘草苷的转移率.采用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)对方中麦冬、桑叶、天花粉、白扁豆、甘草 5味药材进行鉴别.结果 优化的回流提取工艺为浸泡 0h,提取两次,加水量分别为 10、8 倍,提取时间分别为 2.0、1.5 h;成型工艺为以 90%乙醇为润湿剂,加入 20%的糊精制软材,经 16 目筛挤压制粒,60℃下干燥,过 80 筛整粒制备沙参麦冬汤颗粒.10批沙参麦冬汤颗粒、基准样品与颗粒生产各环节的指纹谱图相似度均大于 0.90;基准煎液、冻干粉、提取液、中间体、成品的甘草苷转移率分别为75.60%、75.24%、91.67%、90.22%、73.57%.5味中药的TLC特征斑点清晰,且阴性无干扰.结论 指纹图谱相似度结果表明,各批次、各生产环节沙参麦冬汤颗粒的质量相对稳定,且与基准样品保持一致.经回流提取、浓缩、干燥、制粒后,甘草苷的转移率有所下降,颗粒的甘草苷转移率与原方汤剂的较为接近.本研究所建立的沙参麦冬汤颗粒制备工艺稳定可靠,质量标准检测方法简便可行,重复性好,以期为沙参麦冬汤颗粒的规模生产及其质量控制提供参考.
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编辑人员丨1周前
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7 E教学模式联合SP在普外科护理实习教学中的应用研究
编辑人员丨1周前
目的:探讨7E教学模式[激发(elicit)、参与(engage)、探索(explore)、解释(explain)、精制(elaborate)、评价(evaluate)、延伸(extend)]联合标准化病人(standardized patients,SP)在普外科护理实习教学中的应用。方法:将分配到解放军总医院普外科实习的80名护生作为研究对象,按进科先后顺序分为对照组和观察组,每组40人。对照组采用传统教学,观察组运用7E教学模式联合SP开展教学。考核两组实习护生理论和实践操作成绩,比较组间非技术性技能评分。采用SPSS 22.0进行 t检验。 结果:观察组实习护生理论成绩[(89.36±2.13)vs.(87.64±2.07)]和实践操作考核成绩[(92.07±4.33)vs.(85.19±3.46)]均优于对照组,差异有统计学意义( P<0.05)。观察组护生的非技术性技能评分(人文关怀能力、能激发学习兴趣、与患者沟通交流能力、对疾病的理解深度和护理能力、知识延伸能力、团队协作能力、临床思维能力、临床问题决策能力)均高于对照组,差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:7E教学模式联合SP应用于普外科护理实习带教,能更好地提升实习护生的理论知识和实践操作能力,有利于提高护生非技术性技能水平。
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编辑人员丨1周前
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超滤-纳滤联用技术优化山萸肉中马钱苷浓缩工艺
编辑人员丨1周前
目的:研究山萸肉饮片中马钱苷的浓缩工艺。方法:以马钱苷为指标,采用超滤-纳滤联用技术,在明确跨膜压力差、pH值因素影响的基础上,采用Box-Behnken中心组和设计建立数学模型,考察膜孔径、跨膜压力差、pH值,优选山萸肉提取液的浓缩工艺。结果:超滤可去除多糖,改善溶液可滤性;马钱苷纳滤浓缩工艺为膜孔径400 Da,pH值6.7,跨膜压力差1.20 MPa,马钱苷平均截留率为(91.9±1.7)%,与理论截留率93.6%相近。结论:超滤-纳滤联用精制山萸肉提取液中马钱苷,工艺稳定可行,可避免热处理引起的成分转化损失。
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编辑人员丨1周前
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清咳平喘颗粒在急性呼吸系统疾病的临床应用专家共识
编辑人员丨1周前
清咳平喘颗粒(原名清宣颗粒)出自张仲景《伤寒杂病论》中辛凉重剂麻杏石甘汤,在其基础上增加金荞麦、鱼腥草、川贝母、矮地茶、枇杷叶、紫苏子六味清肺、化痰、解毒之品,经现代制药工艺精制而成,具有清热宣肺、止咳平喘、解毒化痰功效,主要用于急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作属痰热郁肺证患者的治疗。
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编辑人员丨1周前
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吉林省碘酸钾碘盐的稳定性分析
编辑人员丨1周前
目的:探讨吉林省销售的碘酸钾碘盐的稳定性及其影响因素。方法:2020年11月在吉林省全省范围内以市(州)为单位,选择10所大型超市,每所大型超市选择2种碘酸钾碘盐,每种5份,共100份碘盐样品,采用分光光度法(碘-淀粉光度法)检测样品碘含量;将碘盐样品按不同盐种(井矿盐、海盐、湖盐)及不同生产工艺(精制盐、非精制盐)分类,开袋放于室温条件下储存,并分别于开袋后0、10、20 d测定盐碘含量,比较不同盐种、不同生产工艺碘含量衰减率。结果:碘盐样品中井矿盐、海盐、湖盐分别为45、45、10份,存放第0天的碘含量[(19.89 ± 1.38)、(20.62 ± 1.91)、(19.78 ± 1.01)mg/kg]比较,差异无统计学意义( F = 2.57, P = 0.093);第10天时,井矿盐的碘含量低于海盐、湖盐( P均< 0.05);第20天时,井矿盐的碘含量低于海盐( P < 0.05)。井矿盐存放第0、10、20天的碘含量比较,差异有统计学意义( F = 90.62, P < 0.001);海盐、湖盐存放第20天的碘含量均明显低于第0、10天,差异均有统计学意义( P均< 0.05)。井矿盐、海盐、湖盐第0 ~ 10天碘含量衰减率与第10 ~ 20天比较,差异均有统计学意义( Z = 2.24、2.94、2.80, P均< 0.05)。井矿盐、海盐、湖盐存放第0 ~ 10天的碘含量衰减率比较,差异有统计学意义( Z = 24.05, P < 0.001);第10 ~ 20天不同盐种的碘含量衰减率比较,差异无统计学意义( Z = 5.86, P = 0.053)。碘盐存放第0 ~ 10、10 ~ 20天时,精制盐与非精制盐的碘含量衰减率比较,差异均无统计学意义( Z = 1.16、0.28, P均> 0.05);精制盐、非精制盐第0 ~ 10天碘含量衰减率与第10 ~ 20天比较,差异均无统计学意义( Z = 0.76、1.90, P均> 0.05)。 结论:吉林省销售的碘盐包装开封20 d后发生碘损失,其碘含量的衰减受盐种、生产工艺的影响较小。建议食碘盐在打开包装后20 d内食用。
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编辑人员丨1周前
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孕期膳食模式对妊娠期糖尿病发生风险的影响
编辑人员丨1周前
目的:探讨孕期膳食模式对妊娠期糖尿病(GDM)发生风险的影响。方法:为前瞻性队列研究。纳入2018年10月至2019年3月于复旦大学附属妇产科医院产科建卡的1 008例孕妇作为研究对象,收集一般资料、膳食记录、活动情况及口服葡萄糖耐量试验(OGTT)数据。采用主成分分析法提取膳食模式,利用多因素logistic回归模型分析各膳食模式得分的四分位数对GDM发生风险的影响,采用多元线性回归分析法分析膳食模式得分与血糖水平的相关性。结果:本研究中GDM发生率为9.8%(99/1 008)。提取出五种膳食模式,分别为“蔬果-薯类”“菌藻-豆类”“鱼-虾蟹贝类”“精制谷物-红肉内脏”和“添加糖-糕点”。多因素logistic回归分析结果显示,在“鱼-虾蟹贝类”膳食模式下,膳食模式得分处于最高四分位数的孕妇GDM发生风险是最低四分位数的2.64倍,95%可信区间1.17~5.94, Ptrend=0.012;该模式得分与OGTT 1 h和2 h血糖呈正相关( β=0.21, P=0.001; β=0.12, P=0.007)。进一步分析宏量营养素在其中的作用,发现模型中校正碳水化合物供能比、蛋白质供能比或蛋白质/碳水化合物后,“鱼-虾蟹贝类”模式对GDM产生的影响不再显著( P>0.05);同时,在校正碳水化合物供能比或蛋白质/碳水化合物后,该模式对OGTT 1 h和2 h血糖的影响消失( P>0.05)。 结论:本研究中“鱼-虾蟹贝类”膳食模式以高蛋白质和低碳水化合物摄入为特征,增加了GDM患病率,该模式中宏量营养素供能比是影响OGTT结果至关重要的因素。
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编辑人员丨1周前
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全谷物与健康的科学共识(2021)
编辑人员丨1周前
谷物是膳食的重要基础组成部分,也是B 族维生素、矿物质、膳食纤维等营养素的重要食物来源。根据加工程度不同,谷物可分为精制谷物和全谷物。全谷物的特点是保留了完整谷粒所具备的胚乳、胚芽和麸皮及营养成分。它既可以是完整的谷物籽粒,也可以是碾磨、粉碎、压片等简单处理后的产品。经常食用全谷物,不仅可以有助于维持健康体重,还可以降低心血管疾病、2型糖尿病、肠道癌症等疾病的患病风险。应鼓励公众逐步改变“精、细、白”的主食消费习惯,提高全谷物在膳食结构中的比例。
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编辑人员丨1周前
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青海省藏族牧民肥胖流行状况及其与饮食模式关系的队列研究
编辑人员丨1周前
目的:探索青海省城镇化转型中藏族牧民成年人肥胖的流行状况及其与饮食模式的关系。方法:采用开放队列设计,2018年基线入组1 003人,2022年随访599人,新入组1 012人。共纳入≥18岁成年人1 913人,对其开展问卷调查和健康检查。使用因子分析法识别饮食模式,用混合效应模型分析饮食模式与肥胖关系。结果:2018-2022年超重、肥胖和中心性肥胖患病率分别为27.6%、33.8%和54.6%,肥胖和中心性肥胖年龄性别标化患病率均上升。共识别3种饮食模式:现代饮食模式(常食用猪肉、家禽肉类、加工肉类、新鲜水果、含糖饮料、咸味零食等)、城镇饮食模式(常食用精制碳水化合物、牛羊肉、蔬菜和鲜蛋类等)、牧区饮食模式(常食用糌粑、藏式奶酪、酥油茶/奶茶和乳制品等)。校正人口学特征、社会经济状况及生活行为方式后,相比城镇饮食模式得分 T1组, T3组超重和超重/肥胖风险显著增加(超重: OR=2.09,95% CI:1.10~3.95;超重/肥胖: OR=1.23,95% CI:1.00~1.51),而牧区饮食模式得分 T3组超重、肥胖、超重/肥胖和中心性肥胖的风险降低(超重: OR=0.45,95% CI:0.24~0.84;肥胖: OR=0.81,95% CI:0.69~0.95;超重/肥胖: OR=0.75,95% CI:0.61~0.91;中心性肥胖: OR=0.58,95% CI:0.38~0.89)。 结论:城镇化转型中藏族牧民肥胖和中心性肥胖高发。城镇饮食模式是超重、超重/肥胖的危险因素,牧区饮食模式是超重、肥胖、超重/肥胖和中心性肥胖的保护因素。需制定针对性干预措施,提升健康水平。
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编辑人员丨1周前
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化瘀止痛贴膏调节IL-6/STAT3信号通路对急性软组织损伤大鼠炎症反应的影响
编辑人员丨2024/7/13
目的 探讨化瘀止痛贴膏调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对急性软组织损伤(ASTI)大鼠炎症反应的影响.方法 将SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组、精制狗皮膏组.利用机械冲击挫伤法建立ASTI动物模型,建模成功后,各组贴敷相应药物,1次/d,每次给药8 h,连续7 d.对大鼠进行ASTI损伤评分;采用血液流变检测仪检测血液流变学指标;苏木精和伊红(HE)染色法观察大鼠损伤部位肌肉组织病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠损伤部位肌肉组织中IL-6、IL-β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测损伤部位肌肉组织中IL-6与STAT3 mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠损伤部位肌肉组织中L-6/STAT3信号通路蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、IL-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及1L-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平升高(均P<0.05);与模型组比较,化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组和狗皮膏药组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、L-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平降低(均P<0.05);化瘀止痛贴膏高剂量组与精制狗皮膏组大鼠以上指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论 化瘀止痛贴膏可能通过下调L-6/STAT3信号通路缓解ASTI大鼠的炎症反应.
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编辑人员丨2024/7/13
