目的 建立超高效液相色谱串联—四极杆—静电场轨道阱质谱技术(ultra-performance liquid chromatogra-phy-linear ion trap quadrupole-Orbitrap-mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap-MS)对铁皮石斛(Dendrobiumoffi-cinale Kimura&Migo)水提物石油醚、乙酸乙酯、正丁醇3种萃取组分进行定性表征的方法.方法 提取铁皮石斛水提物并依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,旋蒸浓缩后,得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取组分.样品经UPLC-Q-Orbitrap-MS分析,根据元素组成、分子量、质荷比、离子碎片等确定化合物信息并推导裂解规律,通过与文献、MzCloud、MzVault、PudChem、本地数据库比对确定鉴定结果.结果 在正负离子模式下共鉴定出化合物62种,包括黄酮类成分20种,联苄类成分6种,羧酸及其衍生物6种,脂肪酸及其衍生物6种,酚类成分4种,氨基酸及其衍生物3种,糖类成分2种,生物碱类、苯丙素、蒽醌、萜类化合物各1种,其他类成分3种,还检测到8种含量较高、质谱信号较强的未知成分.其中水提石油醚萃取物中鉴定出化合物7种,乙酸乙酯萃取物中鉴定出化合物36种,正丁醇萃取物中鉴定出化合物48种.通过与文献比对,62种化合物中有7种化合物为首次从铁皮石斛中提取得到.结论 该方法可快速有效分析铁皮石斛中多种化学成分,可为铁皮石斛质量控制及药效物质基础研究提供参考.

目的:通过脂质组学方法联合机器学习(ML)多种算法，探索人外周血辐射敏感脂质代谢物分类模型。方法:收集2023年3—9月北京市某综合医院准备接受骨髓移植的25例白血病放射治疗病例，照射前和照射后外周血样本97份，其中对照组24份，为照射前血液样本；辐射组73份，为4、8、12 Gy照射剂量下的24、25和24份血液样本。采用基于超高效液相色谱－串联质谱(UPLC-MS/MS)平台的靶向脂质组学方法，分析辐射组与对照组差异脂质。线性回归筛选0～12 Gy的剂量范围内辐射剂量响应脂质。采用5种机器学习方法构建训练集辐射分类模型，验证集进行模型的验证和评价。结果:与对照组相比，辐射组敏感的脂质代谢物中62个脂质浓度变化差异有统计学意义( t＝－4.91～4.74, P<0.05)，包括鞘磷脂(SM)、胆固醇酯(CE)、神经酰胺(Cer)、磷脂酰肌醇(PI)、己糖神经酰胺(HexCer)、溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)、醚磷脂酰胆碱(PCO)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰乙醇胺(LysoPE)这9大类。在0～12 Gy的剂量范围内，筛选出20种具有良好剂量反应的脂质代谢物，包括11个SM，7个CE，1个Cer和1个PI。决策树(DT)、支持向量机(SVM)、轻量梯度增强机(Light GBM)、随机森林(RF)、K最邻近(KNN)这5种机器学习训练模型拟合均较好(F1＝0.69～1.00)，灵敏度较高。通过评价验证指标，辐射分类判定效果最好的模型为随机森林(灵敏度1.00、准确率0.72、F1值0.80)。 结论:通过靶向脂质组学分析，发现人类样本中辐射响应的脂质代谢物和辐射剂量响应的脂质。机器学习方法中的RF模型可以为探索人类辐射脂质代谢物模型提供新的思路。

目的:研究全氟/多氟化合物（PFASs）的产前暴露与新生儿出生结局的相关性。方法:基于浙江杭州2020—2021年出生的506对母婴队列样本，应用固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法检测产前母血血清中7种PFASs的暴露水平。运用多元线性回归模型分析PFASs的产前暴露对出生体重、身长及阿氏评分（Apgar）的影响。结果:孕妇年龄、产前体重指数以及妊娠周期分别为（31.3±4.3）岁、（26.7±3.2）kg/m 2和（265.0±28.3）d。出生体重、身长、Apgar-1和Apgar-5评分分别为（3.1±0.8）kg、（49.3±2.9）cm、（9.88±0.47）分和（9.99±0.13）分。PFASs广泛暴露于母血血清中，其中全氟辛酸（PFOA）、全氟辛基磺酸（PFOS）和6∶2氯代聚氟烷基醚磺酸（Cl-PFESA）的浓度最高，分别为（18.453±19.557）ng/ml、（6.756±9.379）ng/ml和（5.057±8.555）ng/ml。孕妇年龄、胎次、生产方式与PFASs暴露水平相关（ P<0.05）。亚组分析显示，PFOS对低出生体重（LBW）组新生儿体重（ β=-0.958）、身长（ β=-0.073）及Apgar-5（ β=-0.288）有抑制作用。6∶2 Cl-PFESA和8∶2 Cl-PFESA对LBW组新生儿体重（ β=-0.926； β=-0.552）、身长（ β=-0.074； β=-0.045）有抑制作用。此外4∶2氟调聚物磺酸（FTS）暴露与正常体重组新生儿体重增加（ β=0.111）、Apgar-5评分降低（ β=-0.030）有关。 结论:PFASs的产前暴露与新生儿出生体重、身长和Apgar-5评分之间存在关联，需持续关注PFASs通过母胎传递对胎儿生长发育的影响。

目的:基于高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)建立同时测定那如-3味丸中9个成分的定量分析方法,结合化学模式识别比较不同批次间质量差异.方法:基于HPLC-MS/MS进行定量分析,色谱柱采用Shim-packGIST-HP C18(2.1 mm×100 mm,3 μm),流动相甲醇(A)-0.1％甲酸水(B),流速0.25 mL·min-1,柱温35 ℃,进样量3 μL,正、负离子模式下多反应监测(MRM)方式定量分析16批次那如-3味丸中9个成分含量,并利用微生信科研绘图平台及SIMCA 14.1软件对含量数据进行聚类热图分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal par-tial least squares discriminant analysis,OPLS-DA),进而筛选那如-3味丸质量差异标志物.结果:没食子酸、柯里拉京、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱、乌头碱、胡椒碱在线性范围内呈良好的线性关系(r≥0.999 0),精密度、稳定性、重复性的RSD均小于3.0％,加样回收率范围在95.91％～102.92％.聚类热图和PCA分析将16批样品分为两大类,OPLS-DA法确定了 6个差异标志物,分别为柯里拉京、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱.结论:所建分析方法稳定、可行,HPLC-MS/MS结合化学计量学分析可全面评价不同厂家、不同批次间那如-3味丸差异,并筛选出差异组分,为该制剂工艺优化及质量评价提供参考.

目的 考察从淡豆豉Sojae Semen Praeparatum(SSP)炮制过程中分离的15株产γ-氨基丁酸微生物对产毒黄曲霉菌的拮抗能力并筛选出具有抑制产毒黄曲霉菌生长和降解黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的高效拮抗菌,探究高效拮抗菌发酵产物对黄曲霉毒素(aflatoxins)合成关键基因mRNA表达量的影响.方法 运用平板对峙法与十字交叉法检测15株产Y-氨基丁酸微生物及其发酵产物对产毒黄曲霉标准株(简称:产毒标准株)生长的影响,超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测 15 株菌对 AFB1 的降解效果,考察其对产毒黄曲霉菌的拮抗能力并筛选出高效拮抗菌;针对高效拮抗菌发酵产物分别运用菌丝干重法检测其对产毒标准株菌丝生长的影响,实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测其对黄曲霉毒素合成关键基因(aflR、aflD、aflM、aflP)mRNA表达的影响.结果 15株菌及其发酵产物对产毒标准株的生长抑制率分别在15.88％～56.05％和25.74％～52.12％,对AFB1降解率在2.74％～57.87％,表明它们对产毒黄曲霉菌均有一定的拮抗作用,并筛选出具有高效拮抗作用的黑曲霉菌Aspergillus niger(JC2)和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(Xd1).当高效拮抗菌发酵产物加入量为2 000μL时,JC2和Xd1对产毒标准株菌丝生长的抑制率分别为73.82％和63.34％,且能明显抑制黄曲霉毒素合成关键基因aflR、aflD、aflM、aflP的mRNA表达.结论 淡豆豉炮制中存在既能产γ-氨基丁酸又能明显抑制产毒标准株生长和产毒的拮抗菌,其拮抗作用可能通过抑制产毒标准株菌丝生长和毒素合成关键基因的mRNA表达.

目的 建立Ag/H柱脱氯-超高效液相色谱—质谱法检测出厂水中消毒副产物.方法 样品经Ag/H固相萃取柱除去余氯,再经0.22 μm的膜过滤后,在HSS T3 色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm)上进行分离,采用甲醇-0.000 5%甲酸水溶液梯度洗脱方式,电喷雾负离子(ESI-)模式,多反应监测模式(MRM)进行质谱分析.为校正基质效应,采用基质匹配标准曲线法对一氯乙酸、二氯乙酸、一溴乙酸、一氯一溴乙酸、二溴乙酸、三氯乙酸、一溴二氯乙酸、二溴一氯乙酸和三溴乙酸9种卤乙酸进行定量分析.结果 9种卤乙酸在0.5～100 μg/L内均具有良好的线性关系(r≥0.9995),检测限(S/N=3)为0.012～0.50 μg/L,定量限(S/N=10)为0.036～1.50 μg/L.以自来水为基底根据卤乙酸含量的不同分别进行5.0、20、80 μg/L浓度的加标试验(n=6),平均回收率在75.3%～106.3%,相对标准偏差范围在0.58%～12.8%.结论 该分析方法可用于出厂水中微量卤乙酸的检测.

目的:探究牛膝最佳盐炙工艺.方法:采用超高效液相色谱串联质谱技术,以牛膝补肾壮骨的5种有效成分——β-蜕皮甾酮、25R-牛膝甾酮、25S-牛膝甾酮、人参皂苷R0及竹节参皂苷Ⅳa为评价指标,采用单因素和Box-Behnken设计方法,选择加盐量、炒制温度和炒制时间为考察因素,优化牛膝的盐炙工艺.结果:牛膝盐炙最佳工艺为2%加盐量,炒制温度100℃,炒制时间20 min.结论:所得牛膝盐炙工艺稳定可靠,有利于提高牛膝盐炙品的质量均一性.

背景 精神分裂症是一种常见的重性精神障碍,其发病机制复杂,目前关于精神分裂症外周血清和尿液犬尿氨酸(KYN)代谢物相关性的研究有限.目的 分析精神分裂症患者外周血清和尿液色氨酸(TRP)-KYN代谢物与白细胞介素-6(IL-6)的浓度以及血清与尿液KYN代谢物的相关性以及代谢物水平与临床症状的相关性,以期为探索精神分裂症的潜在生物标志物提供参考.方法 纳入2021年12月—2022年12月在杭州市第七人民医院住院治疗或门诊就诊的、符合《精神障碍诊断与统计手册(第5版)》(DSM-5)精神分裂症诊断标准的38例患者为研究对象,同期在杭州市社区招募健康对照组共26例.采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评定患者的精神病性症状,采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱技术检测所有受试者血清和尿液TRP、KYN、犬尿喹啉酸(KYNA)、喹啉酸(QUIN)、吡啶甲酸(PIC)、黄尿酸和5-羟色胺(5-HT)水平,采用酶联免疫分析检测血清和尿液IL-6水平.采用Pearson相关分析考查精神分裂症患者血清与尿液TRP-KYN代谢物之间的相关性以及代谢物水平与临床症状的相关性.结果 精神分裂症患者血清IL-6水平高于健康对照组,差异有统计学意义(U=798.500,P<0.01).精神分裂症患者尿液PIC水平低于健康对照组,差异有统计学意义(U=253.000,P=0.013).精神分裂症患者血清KYN水平与尿液QUIN/KYNA、QUIN/PIC均呈正相关(r=0.562、0.438,P均<0.05).精神分裂症患者血清5-HT/KYN与PANSS总评分和阴性症状分量表评分均呈正相关(r=0.458、0.455,P均<0.01).结论 精神分裂症患者血清TRP-KYN代谢物水平与尿液中神经毒性代谢物比值有关,并与阴性症状严重程度呈正相关.

目的 建立用于血浆中杜仲各成分含量测定的超高效液相色谱—串联质谱的方法,并进行杜仲及其制剂各成分的药代动力学研究.方法 SD大鼠口服不同的杜仲制剂后,于不同的时间点收集血浆样品,以0.1％甲酸水溶液(A)-0.1％甲酸乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,采用安捷伦SB C18色谱柱(2.1 mmx50 mm,1.8 μm)进行分离;在多反应监测模式下,负离子模式测定;通过Phoenix Winnonlin 8.1软件计算药代动力学参数.结果 原儿茶酸、京尼平苷酸、松脂醇二葡萄糖苷、无梗五加苷、松脂醇葡萄糖苷、京尼平苷、绿原酸、咖啡酸分别在3.2-2000,3.3-2044,0.6-2028,0.6-1770,0.3-2036,0.6-2004,0.5-1596,0.7-1090 ng/mL 范围内,线性良好;专属性、准确度、精密度、稳定性、回收率和基质效应均符合生物样本检定要求.采用非房室模型分析,8个成分在AUC0-∞、t1/2z、Tmax、Cmax、Vz/F、Clz/F、MRT0-∞方面均不相同.结论 该方法灵敏度高、专属性强、准确性好,可用于杜仲成分在大鼠体内的药代动力学研究.不同杜仲制剂在大鼠体内的释药速度、起效快慢及作用强度均不相同,在临床应用上具有指导意义.

目的 探讨基于高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术的甾体激素代谢组学分析对多囊卵巢综合征(PCOS)早期筛查及诊断的应用效果.方法 选取2022年1月—2022年6月丽水市妇幼保健院收治的100例PCOS患者作为观察组,并选取100例同期在医院进行健康体检者作为对照组.比较两组患者各类甾体激素水平,筛选具备差异性指标作为因变量建立联合诊断模型,进行logistic回归分析,随后根据患者工作特征(ROC)曲线分析LC-MS/MS的诊断价值.结果 观察组雄烯二酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸脂、17-羟孕烯醇酮、皮质醇、11-脱氧皮质醇、孕酮及睾酮水平高于对照组,且治疗后各指标水平下降,皮质酮水平低于对照组,且治疗后其水平升高(P＜0.05);logistic回归分析显示,雄烯二酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸脂及17-羟孕烯醇酮及睾酮水平过高,均为影响患者发生PCOS相关因素;ROC曲线分析显示,雄烯二酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸脂、17-羟孕烯醇酮、睾酮及联合检测AUC分别为0.887、0.809、0.871、0.860、0.884及0.993,联合检测AUC最高;治疗后,PCOS患者雄烯二酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸脂、17-羟孕烯醇酮、皮质醇、11-脱氧皮质醇、孕酮及睾酮水平均较治疗前低,皮质酮水平较治疗前高(P＜0.05).结论 LC-MS/MS技术与多种甾体激素联合检测诊断价值较高,可提高对PCOS诊断率,并利于进行早期筛选.