目的:探讨微小RNA-579-3p(miR-579-3p)/含锌指和BTB域4(ZBTB4)通路在胃癌上皮-间充质转化(EMT)中的作用机制。方法:生物信息学筛选胃癌与癌旁组织差异表达的微小RNA(miRNA)；实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测50例患者胃癌和癌旁癌旁组织中miR-579-3p、ZBTB4表达；检测胃上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株HGC27、AGS、MKN45中miR-579-3p的表达，分析miR-579-3p与临床病理特征的关系。生物信息学分析miR-579-3p靶基因。双荧光素酶报告基因验证miR-579-3p与ZBTB4的调控关系。应用miR-579-3p抑制物(inhibitor)干扰HGC27细胞株miR-579-3p表达，细胞计数试剂盒(CCK-8)法、划痕实验、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力；RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测mRNA和蛋白表达水平。采用 t检验、 χ2检验分析数据。 结果:生物信息学筛选后RT-qPCR检测结果发现miR-579-3p在胃癌组织中表达显著高于癌旁组织(3.259±1.307比1.326±0.419， t＝9.959， P<0.01)，miR-579-3p表达与胃癌分化和淋巴结转移明显相关( χ2＝4.500、7.714， P<0.05)；miR-579-3p在胃癌细胞株表达均高于GES-1( P<0.01)。转染miR-579-3p抑制剂的HGC-27细胞活性(0.500±0.068比1.223±0.089， t＝15.780， P<0.01)、迁移率(0.228±0.039比0.533±0.056， t＝7.707， P<0.01)和侵袭细胞数[(89.000±7.550)个比(206.700±8.505)个， t＝17.92， P<0.01]显著低于对照组。RT-qPCR结果显示miR-579-3p inhibitors组波形蛋白(Vimentin)(0.248±0.030比1.061±0.150， t＝9.258， P<0.01)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)(0.178±0.030比1.013±0.195， t＝3.320， P<0.01)和连接蛋白细胞黏附分子(Nectin-4)(0.465±0.065比1.042±0.154， t＝5.990， P<0.01)的mRNA表达明显低于对照组，而E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA(3.249±0.460比1.000±0.175， t＝7.990， P<0.01)的表达明显高于对照组，Western blot检测显示抑制miR-579-3p表达后Vimentin(0.420±0.271比1.004±0.095， t＝3.528， P<0.05)、MMP-2(0.663±0.119比0.922±0.068， t＝3.283， P<0.05)、Nectin-4表达(0.660±0.130比0.919±0.080， t＝2.982， P<0.05)低于对照组，而E-cadherin蛋白表达(1.352±0.113比0.994±0.005， t＝5.483， P<0.01)高于对照组。生信分析结果显示ZBTB4是miR-579-3p靶基因；双荧光素酶报告基因分析表明过表达miR-579-3p后野生组中ZBTB4基因活性明显低于对照组(0.323±0.020比1.095±0.131， t＝11.690， P<0.01)。RT-qPCR显示ZBTB4在胃癌组织中表达低于癌旁组织( t＝7.713， P<0.01)；皮尔逊相关分析结果显示ZBTB4与miR-579-3p呈负相关( r＝－0.470， P<0.01)。RT-qPCR和Western blot显示抑制miR-579-3p后ZBTB4表达明显增强( P<0.01)。 结论:miR-579-3p/ZBTB4通路激活促进胃癌的EMT。

目的:探讨黏附分子nectin-1的表达对大鼠癫痫发作及苔藓纤维出芽的影响。方法:(1)选取成年雄性SD大鼠36只按照随机数字表法分为对照组( n=6)、空载体组( n=6)和病毒干扰组( n=24)，其中病毒干扰组按病毒注射后时间点进一步分为3 d、7 d、14 d及30 d 4个亚组，各亚组6只。采用Western blotting实验检测各组大鼠海马区nectin-1蛋白表达情况。(2)另选取成年雄性SD大鼠12只按照随机数字表法分为病毒干扰癫痫组( n=6)及空载体癫痫组( n=6)。向2组大鼠海马分别注入等量基因干扰慢病毒和慢病毒空载体并点燃匹罗卡品癫痫模型，观察2组大鼠行为学变化，通过Timm染色观察大鼠海马区苔藓纤维出芽的情况。 结果:(1)各组大鼠海马区nectin-1蛋白表达差异有统计学意义( F=76.120， P=0.000)。与对照组及空载体组比较，病毒干扰组中7 d、14 d、30 d亚组大鼠海马组织中nectin-1表达均明显降低，差异有统计学意义( P<0.05)。(2)大鼠行为学比较：病毒干扰癫痫组大鼠点燃所需时间[(34.33±2.38) min]较空载体癫痫组大鼠[(24.50±2.06) min]明显延长，差异有统计学意义( t=7.650， P=0.000)。发作级别：病毒干扰癫痫组大鼠造模后1 h内各时间点癫痫发作级别均较空载体癫痫组大鼠低，差异具有统计学意义( P<0.05)。大鼠癫痫点燃后至30 d，与空载体癫痫组比较，病毒干扰癫痫组大鼠出现自发发作时间延长，自发发作次数减少，差异均具有统计学意义( P<0.05)。Timm染色：病毒干扰癫痫组Timm染色评分[(3.500±0.224)分]较空载体癫痫组大鼠[(4.667±0.211)分]明显降低，差异具有统计学意义( t=9.289， P=0.000)。 结论:癫痫大鼠海马区nectin-1表达被抑制后能延缓大鼠癫痫发生，减少癫痫的自发发作次数，其作用机制可能与nectin-1减少海马区异常神经回路苔藓纤维出芽的形成有关。

目的:探讨富含半胱氨酸型运动神经元蛋白1（CRIM1）对非小细胞肺癌（NSCLC）辐射敏感性和转移的影响及可能的机制。方法:采用短发夹RNA（shRNA）敲降NSCLC H460、H358细胞中CRIM1的表达，并将H460、H358细胞分别分为3组：H460细胞、H460-shCRIM1细胞、H460-shNC细胞和H358细胞、H358-shCRIM1细胞、H358-shNC细胞，其中shCRIM1表示用shRNA敲降CRIM1的表达，shNC表示阴性对照。采用小干扰RNA（siRNA）敲降H358细胞中CRIM1的表达，并将细胞分为2组：H358-siNC细胞和H358-siCRIM1细胞。采用细胞克隆形成实验（照射剂量为0、1、2、4 Gy）、慧星实验（照射剂量为8 Gy）和细胞免疫荧光实验（照射剂量为6、8、12 Gy）观察CRIM1对H460细胞辐射敏感性的影响。采用Transwell实验、细胞黏附实验观察CRIM1对H460、H358细胞转移的影响。构建小鼠H460原位肿瘤模型，采用组织病理学检查评估裸鼠肺内原位接种肿瘤转移情况。采用转录组学分析法探讨CRIM1影响NSCLC细胞转移的可能机制。组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:克隆形成实验结果显示，与H460-shNC细胞相比，1、2 Gy照射后H460-shCRIM1细胞的克隆形成率明显降低[1 Gy：（87.04±8.04）%对（58.01±4.39）%；2 Gy：（48.23±1.22）%对（31.43± 0.08）%]，且差异均有统计学意义（ t=4.48、19.50，均 P<0.05）。慧星实验结果显示，8 Gy照射后H460-shCRIM1细胞的olive尾距长于H460-shNC细胞，且差异有统计学意义（1.27±0.54对1.05±0.42， t=2.14， P<0.05）。细胞免疫荧光实验结果显示，H460-shCRIM1细胞受照后磷酸化组蛋白H2AX foci数多于H460-shNC细胞（6 Gy：14.33±2.81对11.00±3.92；8 Gy：34.00±11.14对21.17±6.15；12 Gy：25.80±3.96对20.17±3.31），且差异均有统计学意义（ t=2.45、5.52、2.47，均 P<0.05）。Transwell实验结果显示，H460-shCRIM1、H358-shCRIM1细胞的迁移率分别较H460-shNC、H358-shNC细胞明显升高，且差异均有统计学意义（ t=4.73、10.19，均 P<0.05）。细胞黏附实验结果显示，H460-shCRIM1、H358-shCRIM1细胞的黏附能力分别较H460-shNC、H358-shNC细胞下降，且差异均有统计学意义（ t=2.86、3.66，均 P<0.05）。组织病理学检查结果显示，原位接种H460-shCRIM1细胞的裸鼠肺内转移灶明显多于H460-shNC细胞。转录组学分析结果显示，筛选出的细胞黏附相关基因连接黏附分子2（JAM2）、连接蛋白3（NECTIN3）和紧密连接蛋白4（CLDN4）在H460-shCRIM1、H358-siCRIM1细胞中的表达均下降；并在体外实验中得到验证，其中，H460-shCRIM1细胞相较于H460-shNC细胞分别下降了86.66%、49.35%、30.27%（ t=47.52、7.47、18.98，均 P<0.05），H358-siCRIM1细胞相较于H358-siNC细胞分别下降了36.60%、31.70%、50.00%（ t=7.40、7.10、16.56，均 P<0.05）。 结论:抑制CRIM1可增强NSCLC细胞H460的辐射敏感性，CRIM1可能通过影响肿瘤细胞连接的方式影响NSCLC的转移。

CD155（PVR/Necl-5）是一种细胞黏附分子，在肿瘤进展中发挥重要作用。CD155通过调节肿瘤相关信号通路，影响细胞增殖、迁移侵袭及黏附；或与免疫细胞上的DNAX辅助分子-1、T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域和CD96相互作用，影响T细胞及自然杀伤细胞功能。在多种类型肿瘤细胞上均检测到CD155表达上调，且与患者预后不良密切相关，可作为预测肿瘤患者生存的生物标志物。CD155及其相应受体有望成为免疫疗法的新型靶点，在肿瘤治疗领域具有极大潜力。本文将从CD155基本结构、生物学功能及其与肿瘤诊断、预后和免疫治疗等方面对CD155研究进展作一综述。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）RP13-349O20.2在子宫颈癌组织中的表达水平，及其体外对子宫颈癌细胞迁移、侵袭能力和化疗敏感性的影响及可能机制。方法:利用GEPIA.CANCER网站（数据更新时间2023年6月）分析RP13-349O20.2表达水平与253例子宫颈癌患者总生存的关系。回顾性收集2020年1月至2022年8月徐州医科大学附属滕州市中心人民医院40例子宫颈癌患者癌组织和癌旁组织（距离肿瘤边缘>2 cm），采用人正常子宫颈上皮细胞株H8和人子宫颈癌细胞株HCC94、C33A、Hela、HCC1106、SiHa进行体外细胞实验。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测子宫颈癌组织和癌旁组织、各细胞株中RP13-349O20.2的相对表达量。向RP13-349O20.2相对表达水平最高的C33A细胞分别转染RP13-349O20.2的小干扰RNA（siRNA）及其阴性对照序列的siRNA，分别为si-RP13-349O20.2组和si-Con组。采用划痕愈合实验检测两组C33A细胞的迁移能力，Transwell实验检测C33A细胞侵袭能力，CCK-8法检测C33A细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性（以吸光度值表示细胞增殖能力，吸光度值越低，增殖能力越弱，则对药物敏感性越强）。双荧光素酶报告基因实验验证RP13-349O20.2和miRNA-493-5p（miR-493-5p）、miR-493-5p和Nectin-4的靶向关系。采用qRT-PCR检测两组C33A细胞miR-493-5p和Nectin-4 mRNA的相对表达量，蛋白质印迹法检测两组细胞Nectin-4蛋白和PI3K-AKT信号通路相关蛋白的表达情况。结果:根据GEPIA.CANCER网站数据分析显示，RP13-349O20.2低表达患者的总生存较高表达患者好（ P<0.01）。40例子宫颈癌患者癌组织和癌旁组织中RP13-349O20.2相对表达量分别为4.04±0.32和1.18±0.14，差异有统计学意义（ t＝8.29， P<0.01）。与H8细胞比较，人子宫颈癌细胞株HCC94、C33A、Hela、HCC1106、SiHa细胞中RP13-349O20.2表达水平均高（均 P<0.01）。si-Con组和si-RP13-349O20.2组C33A细胞中RP13-349O20.2相对表达量分别为7.30±0.30和1.01±0.27，差异有统计学意义（ t＝15.62， P<0.01）。si-Con组和si-RP13-349O20.2组C33A细胞划痕抑制率分别为（32±9）%和（75±6）%（ t＝3.97， P<0.01），侵袭细胞数分别为（106±12）个和（36±8）个（ t＝4.79， P<0.01）。在5、10、20、40、80 μmol/L 5-氟尿嘧啶作用24 h后，si-RP13-349O20.2组C33A细胞吸光度值均低于si-Con组。双荧光素酶报告基因实验证实P13-349O20.2与miR-493-5p存在靶向关系（ P<0.01），miR-493-5p与Nectin-4存在靶向关系（ P<0.01）。si-Con组和si-RP13-349O20.2组C33A细胞miR-493-5p的相对表达量分别为1.02±0.13和5.48±0.85（ t＝5.21， P<0.01），Nectin-4 mRNA的相对表达量分别为5.65±0.33和0.99±0.34 （ t＝9.87， P<0.01）。si-RP13-349O20.2组C33A细胞中Nectin-4蛋白表达水平较si-Con组低（ t＝9.21， P＝0.001），PI3K-AKT信号通路蛋白p-STAT3、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR表达水平均低于si-Con组（均 P<0.01）。 结论:子宫颈癌组织中RP13-349O20.2水平较高，且其高表达可能预示患者预后不良。体外干扰RP13-349O20.2表达能够抑制子宫颈癌细胞迁移、侵袭能力，促进子宫颈癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性，其机制可能与miR-493-5p/Nectin-4信号通路和PI3K-AKT信号通路有关。

近年来免疫检查点抑制剂是癌症免疫治疗研究的一个重要里程碑。靶向程序性死亡受体1（PD-1）、程序性死亡受体-配体1（PD-L1）或细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）的单克隆抗体在临床试验和临床应用中发挥着巨大的作用，并且当治疗有效时可产生持久的临床反应，已经成功获批应用于多种肿瘤的治疗。但是，因为其总体的应答率不高，仅使部分患者受益。因此，亟需探索新型的免疫检查点抑制剂，并且探究其作用机制进一步发展肿瘤免疫疗法。CD112R是免疫细胞表达的免疫球蛋白超家族受体，与肿瘤细胞表达的 Nectin-2/Necl 家族配体（CD112）相互结合，在肿瘤免疫治疗中具有很大的潜力，是新一代的抑制性免疫检查点。本文将对CD112-CD112R轴的分子结构与在肿瘤免疫反应中的作用进行阐述，探讨在癌症免疫治疗中的潜在应用。

目的:为探究PRV-2022毒株gD蛋白不同突变对与Nectin-1受体结合的影响。方法:通过PCR、RT-qPCR和基因测序技术对PRV-2022毒株进行鉴定，利用生物信息学方法对PRV-2022毒株gD基因进行遗传进化分析。体外构建PRV-2022毒株gD蛋白胞外域第69位和第82位氨基酸突变的重组表达质粒并表达纯化，通过His-pull down和生物层干涉技术比较了重组gD蛋白不同突变与Nectin-1受体的结合能力。结果:从伪狂犬病毒PRV-2022毒株中调取gD基因，通过遗传进化分析发现PRV-2022毒株与2011年之前分离的毒株分属于同一个分支，遗传距离较近。成功构建含有A69V和S82N氨基酸突变的gD蛋白胞外域表达质粒，表达纯化得到重组PRV gD胞外域蛋白，比较发现gD-69、gD-82、gD-2022、gD-Bartha蛋白均能与Nectin-1相互作用。相对于PRV经典疫苗株Bartha，gD蛋白第69位和第82位氨基酸双突变后与人Nectin-1亲和力最高，而无论单独任一突变位点都使gD蛋白与Nectin-1的亲和力降低。结论:PRV的gD蛋白存在A69V和S82N突变时明显影响与人Nectin-1受体结合能力且同时突变时与人Nectin-1亲和力最高。

目的:探讨帕妥珠单抗治疗人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌患者的疗效及对血清结合素-4(nectin-4)与胸苷激酶1(TK-1)表达的影响。方法:回顾性分析2014年6月至2016年12月在北京市隆福医院治疗的110例HER2阳性乳腺癌患者的临床资料，按治疗方法分为观察组和对照组，各55例。对照组给予多西他赛联合铂类(TP)新辅助化疗，观察组给予TP新辅助化疗联合帕妥珠单抗治疗，均治疗18周后观察两组患者的治疗效果，观察治疗后患者血清肿瘤标志物[糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)、糖类抗原199(CA199)]、免疫功能、nectin-4与TK-1水平以及不良反应。结果:观察组的总有效率为83.64%(46/55)，显著高于对照组[58.18%(32/55)]，差异有统计学意义( P<0.05)；治疗后两组患者的CA125、CA153、CA199水平均下降，且观察组下降更显著，差异有统计学意义( P<0.05)；治疗后两组患者的CD3 ＋、CD4 ＋、CD4 ＋/CD8 ＋水平均升高，CD8 ＋水平下降，两组比较差异无统计学意义( P>0.05)；治疗后两组患者的nectin-4、TK-1水平均下降，且观察组下降更明显，差异有统计学意义( P<0.05)；两组患者的消化系统、白细胞计数、心脏毒性等不良反应比较差异无统计学意义( P>0.05)；2年随访，观察组病死率为3.64%(2/55)，对照组病死率为10.91%(6/55)，观察组病死率显著低于对照组，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:帕妥珠单抗、TP方案新辅助化疗治疗HER2阳性乳腺癌患者的效果较好，可有效地抑制肿瘤组织的生长，降低血清肿瘤标志物和nectin-4、TK-1水平，对患者免疫应答反应影响较小，不良反应较少，且病死率较低，在临床上可广泛使用。

目的:探讨Nectin-4靶向探针 68Ga-N188在胰腺癌诊断中的应用价值。 方法:采用前瞻性研究方法。选取2022年8—12月北京大学第一医院收治的16例经增强CT检查诊断为胰腺癌患者的临床病理资料；男9例，女7例；年龄为（62±8）岁。患者均行 18氟-脱氧葡萄糖（ 18F-FDG）和 68Ga-N188正电子发射断层显像（PET）/CT检查。观察指标：（1） 68Ga-N188在患者不同组织和肿瘤原发灶中的分布。（2）胰腺肿瘤中Nectin-4的表达和 68Ga-N188的摄取。（3） 68Ga-N188与 18F-FDG的PET/CT检查结果比较。正态分布的计量资料以 x±s表示，组间比较采用独立样本 t检验。计数资料以绝对数或百分率表示。 结果:（1） 68Ga-N188在患者不同组织和肿瘤原发灶中的分布。PET/CT检查结果显示：注射后1 h， 68Ga-N188在16例患者脂肪、肌肉、皮肤、脑组织中的最大标准摄取值（SUVmax）和平均标准摄取值（SUVmean）分别为0.40±0.16和0.25±0.09、0.68±0.20和0.44±0.12、0.39±0.14和0.28±0.11、0.09±0.04和0.05±0.02；在食管、肝脏、脾脏、胰腺组织中，上述指标分别为1.53±0.48和1.16±0.31、1.49±0.45和0.91±0.30、1.40±0.30和1.02±0.24、1.24±0.31和0.96±0.25；在肿瘤原发灶中，上述指标分别为3.28±1.02和2.14±0.62，与胰腺组织比较，差异均有统计学意义（ t=8.03，6.75， P<0.05）。肿瘤原发灶中，基于SUVmax的肿瘤背景比为1.82±0.58。（2）胰腺肿瘤中Nectin-4的表达和 68Ga-N188的摄取。免疫组织化学染色结果显示：16例患者中，Nectin-4高表达7例，低表达9例。PET/CT检查结果显示：7例Nectin-4高表达和9例低表达患者肿瘤原发灶中， 68Ga-N188的SUVmax分别为3.77±1.10和2.64±0.68，两者比较，差异有统计学意义（ t=2.64， P<0.05）。 18F-FDG在7例Nectin-4高表达和9例低表达患者肿瘤原发灶中的SUVmax分别为6.73±3.24和6.43±3.45，两者比较，差异无统计学意义（ t=0.17， P>0.05）。（3） 68Ga-N188与 18F-FDG的PET/CT检查结果比较。16例患者中，14例经术后组织病理学检查诊断为胰腺癌患者肿瘤原发灶 68Ga-N188和 18F-FDG PET/CT检查阳性分别为14例和11例；其中3例经化疗后评估疗效胰腺癌患者肿瘤原发灶 68Ga-N188和 18F-FDG PET/CT检查阳性分别为3例和1例。3例接受化疗和11例未接受化疗胰腺癌患者肿瘤原发灶 18F-FDG的SUVmax分别为2.80±0.69和6.97±2.11，两者比较，差异有统计学意义（ t=3.29， P<0.05）， 68Ga-N188的SUVmax分别为3.38±1.12和2.93±0.50，两者比较，差异无统计学意义（ t=0.66， P>0.05）。6例经术后组织病理学检查诊断有淋巴结转移胰腺癌患者淋巴结转移灶 68Ga-N188和 18F-FDG PET/CT检查阳性分别为6例和4例，转移灶中 68Ga-N188和 18F-FDG的SUVmax分别为2.25±1.12和4.02±1.27。 结论:68Ga-N188 PET/CT检查可用于胰腺癌原发灶和淋巴结转移灶影像学诊断。

抗体药物偶联物（ADC）可通过连接子将细胞毒性药物和针对肿瘤细胞靶点的抗体相结合，实现肿瘤精准靶向化疗。人表皮生长因子受体（HER）2靶点ADC恩美曲妥珠单抗及德曲妥珠单抗疗效卓越，已被批准为HER2阳性转移性乳腺癌的标准二线治疗药物。滋养层细胞表面抗原-2靶点ADC戈沙妥珠单抗在转移性三阴性乳腺癌治疗中疗效显著。其他如连接蛋白4、间皮素、LIV-1、受体酪氨酸激酶样孤儿受体、HER3靶点ADC疗效尚可，前景广阔。进一步探讨ADC在转移性乳腺癌治疗中的研究进展，可为ADC的应用和开发提供思路。