目的:比较青蒿琥酯(Art)和扶正化瘀方治疗血吸虫病肝纤维化对线粒体自噬的影响。方法:将80只C57BL/6雌性小鼠随机分为健康组、感染组、Art治疗组和扶正化瘀方治疗组，每组20只。感染组及治疗组小鼠感染日本血吸虫尾蚴16条。6周后，吡喹酮（300 mg/kg）2日疗法杀虫。Art治疗组采用每天100 mg/kg腹腔注射的方式进行治疗，扶正化瘀方治疗组采用每天饲料给药，每1 kg饲料含16 g扶正化瘀方，6周后，取4组小鼠新鲜肝组织。Masson染色观察、蛋白质印迹分析肝组织中参与线粒体三羧酸循环反应的琥珀酸脱氢酶亚单位A（SDHA）、苹果酸脱氢酶(MDH2）、柠檬酸合酶（CS）、酮戊二酸脱氢酶（OGDH）；雷帕霉素靶蛋白1（mTORC1）通路；腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和线粒体自噬通路激酶（PINK1）的相对表达水平。提取各组肝脏组织样品的线粒体检测线粒体的耗氧率。双因素方差分析比较各组间蛋白表达的差异。结果:Masson染色显示，感染组小鼠肝脏纤维化面积显著高于健康组并且Art治疗组和扶正化瘀方治疗组小鼠肝脏纤维化面积均低于感染组。蛋白质印迹法分析结果显示，SDHA蛋白相对表达量感染组（0.82±0.05）与健康组（1.00±0.05）相比显著下降（ t = 11.23， P = 0.004），并且Art治疗组（0.73±0.05）显著高于感染组（ t = 10.79， P = 0.007），但是扶正化瘀方组（0.98±0.05）与健康组比较，差异无统计学意义（ t = 1.925， P = 0.127）；感染组p-AMPK的蛋白质相对表达量（1.15±0.05）显著高于健康组（0.98±0.07， t = 12.18， P = 0.003），Art治疗组（0.50±0.05）相比较于感染组p-AMPK的表达显著降低（ t = 11.78， P = 0.003）。感染组AMPK的蛋白质相对表达量（0.80±0.05）显著低于健康组（1.00±0.05， t = 10.53， P = 0.005），Art治疗组（0.54±0.05）相比较于感染组AMPK的表达显著降低（ t = 13.98， P = 0.004）；感染组p-mTORC1的蛋白质相对表达量（0.93±0.08）与健康组相比差异无统计学意义（ t = 2.28， P = 0.065），而Art治疗组的表达量（0.63±0.05）显著低于感染组（ t = 10.58， P = 0.029）；感染组p-mTORC1/m-TORC1（0.98±0.03）相对于健康对照组（0.97±0.03， t = 0.98， P = 0.085）差异无统计学意义，Art治疗组（0.48±0.05）相对于感染组显著下降（ t = 14.58， P = 0.009）。感染组PINK1的蛋白质相对表达量（0.55±0.05）显著低于健康组（1.00±0.03， t = 13.49， P = 0.001），Art治疗组（1.21±0.05， t = 9.98， P = 0.005）和扶正化瘀方治疗组（1.31±0.35， t = 6.98， P = 0.027）均显著高于感染组。线粒体功能检测显示，加入复合物Ⅱ底物（琥珀酸）后感染组耗氧量低于健康组而Art治疗组和扶正化瘀方治疗组均高于感染组，加入复合物IV底物（抗坏血酸+三甲基戊二醇）后感染组耗氧量低于健康组而Art治疗组和扶正化瘀方治疗组显著高于感染组。 结论:Art通过抑制AMPK/mTORC1信号通路活性并增强线粒体耗氧量和自噬及SDHA表达而缓解血吸虫病肝纤维化。

目的:比较青蒿琥酯(Art)和扶正化瘀方治疗血吸虫病肝纤维化对线粒体自噬的影响。方法:将80只C57BL/6雌性小鼠随机分为健康组、感染组、Art治疗组和扶正化瘀方治疗组，每组20只。感染组及治疗组小鼠感染日本血吸虫尾蚴16条。6周后，吡喹酮（300 mg/kg）2日疗法杀虫。Art治疗组采用每天100 mg/kg腹腔注射的方式进行治疗，扶正化瘀方治疗组采用每天饲料给药，每1 kg饲料含16 g扶正化瘀方，6周后，取四组小鼠新鲜肝组织。Masson染色观察、蛋白质印迹分析肝组织中参与线粒体三羧酸循环反应的琥珀酸脱氢酶亚单位A（SDHA）、苹果酸脱氢酶（MDH2）、柠檬酸合酶（CS）、酮戊二酸脱氢酶（OGDH）；雷帕霉素靶蛋白1（mTORC1）通路；腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和线粒体自噬通路激酶（PINK1）的相对表达水平。提取各组肝脏组织样品的线粒体检测线粒体的耗氧率。双因素方差分析比较各组间蛋白表达的差异。结果:Masson染色显示，感染组小鼠肝脏纤维化面积显著高于健康组并且Art治疗组和扶正化瘀方治疗组小鼠肝脏纤维化面积均低于感染组。蛋白质印迹法分析结果显示，SDHA蛋白相对表达量感染组（0.82±0.05）与健康组（1.00±0.05）相比显著下降（ t = 11.23， P = 0.004），并且Art治疗组（0.73±0.05）显著高于感染组（ t = 10.79， P = 0.007），但是扶正化瘀方组（0.98±0.05）与健康组比较，差异无统计学意义（ t = 1.925， P= 0.127）；感染组p-AMPK的蛋白质相对表达量（1.15±0.05）显著高于健康组（0.98±0.07， t = 12.18， P = 0.003），Art治疗组（0.50±0.05）相比较于感染组p-AMPK的表达显著降低（ t= 11.78， P= 0.003）。感染组AMPK的蛋白质相对表达量（0.80±0.05）显著低于健康组（1.00±0.05， t = 10.53， P = 0.005），Art治疗组（0.54±0.05）相比较于感染组AMPK的表达显著降低（ t= 13.98， P= 0.004）；感染组p-mTORC1的蛋白质相对表达量（0.93±0.08）与健康组相比差异不显著（ t = 2.28， P= 0.065），而Art治疗组的表达量（0.63±0.05）显著低于感染组（ t= 10.58， P = 0.029）；感染组p-mTORC1/m-TORC1（0.98±0.03）相对于健康对照组（0.97±0.03， t = 0.98， P= 0.085）差异无统计学意义，Art治疗组（0.48±0.05）相对于感染组显著下降（ t= 14.58, P = 0.009）。感染组PINK1的蛋白质相对表达量（0.55±0.05）显著低于健康组（1.00±0.03， t= 13.49, P= 0.001），Art治疗组（1.21±0.05, t= 9.98, P= 0.005）和扶正化瘀方治疗组（1.31±0.35， t= 6.98， P= 0.027）均显著高于感染组。线粒体功能检测显示，加入复合物Ⅱ底物后感染组耗氧量低于健康组而Art治疗组和扶正化瘀方治疗组均高于感染组，加入复合物Ⅲ底物后感染组耗氧量低于健康组而Art治疗组和扶正化瘀方治疗组显著高于感染组。 结论:Art通过抑制AMPK/mTORC1信号通路活性并增强线粒体耗氧量和自噬及SDHA表达而缓解血吸虫病肝纤维化。

血吸虫病是一种人畜共患寄生虫病，被《中华人民共和国传染病防治法》列为乙类传染病。影响血吸虫病流行的因素众多，包括经济、社会、自然与生物等，因此血吸虫病疫情容易出现反弹 [1]。我国是日本血吸虫病流行区 [2]。近年来，在调整防治策略，并经过一系列防治措施的实施后，我国血吸虫病的疫情得到根本改善，流行程度大大降低 [3]。本文对我国2011—2020年血吸虫疫情进行分析，对防控效果进行总结，并对现存问题进行分析，现报告如下。

目的 研究血吸虫病相关性肺高血压的超声心动图特征.方法 从超声心动图肺高血压高度可能的前瞻性研究队列中筛选肝脾型血吸虫病患者10例为观察组,其他病因性肝病12例为对照组,分析超声心动图特征.结果 与对照组比较,观察组有较高的年龄[84(81～88)岁(P=0.029)];心力衰竭、心房颤动、慢性肾衰竭发病率较高(P＜0.05);左心疾病、慢性肺病、肝硬化、门脉高压发病率差异无统计学意义(P＞0.05);房室内径较小,但仅右心室长径和基底径差异有统计学意义(P＜0.05);三尖瓣反流峰速[3.9(3.4～4.5)m/s]和肺血管阻力[2.5(2.3～3.4)]WU(Wood单位)差异无统计学意义(P＞0.05);右心功能不全检出率(50.0％)较高(P=0.005).Kaplan-Meier生存分析发现右心功能不全显著缩短心力衰竭再入院时间(x2=8.323,P=0.004).结论 血吸虫病相关性肺高血压心脏形态和功能类似限制型心肌病样改变,因右心力衰竭再入院率高.

目的 研究阻断白细胞介素9(IL-9)对日本血吸虫(Sj)感染小鼠肝组织免疫损伤以及肠道菌群的影响,探讨阻断IL-9改善血吸虫病免疫病理损伤的机制.方法 将15只实验小鼠随机分成正常对照组、Sj组和IL-9阻断组.Sj组和IL-9阻断组小鼠分别感染(15±1)条日本血吸虫尾蚴,IL-9阻断组小鼠每周腹腔注射IL-9抗体2次,Sj组小鼠每周腹腔注射IgG抗体2次作为同型对照.感染9周后处死小鼠,收取肝脏组织进行苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色及免疫组化;收取小鼠结肠内容物,对肠道微生物进行宏基因组测序.结果 HE、Masson染色显示,单个肉芽肿面积百分比,Sj组(58.6±4.9)%>IL-9阻断组(37.0±2.1)%,差异有统计学意义(F=678.4,P<0.001).胶原沉积面积百分比,Sj组(35.5±2.0)%>IL-9阻断组(16.2±0.3)%>正常对照组(0.4±0.1)%,差异有统计学意义(F=1 314.0,P<0.001).免疫组化染色显示,IL-9阻断后小鼠肝组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、胶原Ⅰ和胶原Ⅲ蛋白的表达水平显著降低.α-SMA蛋白表达百分比,Sj组(29.9±4.0)%>IL-9阻断组(14.9±1.4)%>正常对照组(1.4±0.4)%,差异有统计学意义(F=267.9,P<0.001);胶原Ⅰ蛋白表达百分比,Sj组(33.9±1.2)%>IL-9 阻断组(16.2±0.7)%>正常对照组(1.3±0.2)%,差异有统计学意义(F=3 112.0,P<0.001);胶原Ⅲ蛋白表达百分比,Sj组(14.5±3.0)%>IL-9阻断组(5.3±0.6)%>正常对照组(1.4±0.2)%,差异有统计学意义(F=131.1,P<0.001).小鼠肠道微生物宏基因组测序显示,与正常对照组比较,Sj组和IL-9阻断组小鼠肠道菌群的多样性和物种丰富度均降低,其中IL-9阻断组与正常对照组差异有统计学意义(P=0.002),温生菌、巴恩斯氏菌、未分类肠杆菌、埃希氏菌属等的丰度发生显著变化.结论 体内阻断IL-9可改变日本血吸虫感染小鼠肠道菌群的物种结构、多样性,并且这种改变可能与日本血吸虫病免疫病理的发生发展密切相关.

目的 以棘球蚴囊液纯化抗原特异性单克隆抗体为基础建立一种快速、简便诊断棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法,并对其进行评价.方法 纯化棘球蚴囊液抗原,并以此免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其亚类和效价.筛选基于棘球蚴囊液纯化抗原制备的单克隆抗体对,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记筛选到的单克隆抗体,并将其吸附于交联垫;将另一筛选到的单克隆抗体划线包被于同一硝酸纤维素膜适当位置,制成免疫层析试条.用该试条检测手术确诊的细粒棘球蚴病(87例)、多房棘球蚴病(40例)、囊尾蚴病(25例)、日本血吸虫病(10例)、弓形虫病(5例)、并殖吸虫病(5例)、华支睾吸虫病(5例)患者血清,以及60例健康者血清,以评价其检测的敏感性和特异性.结果 以棘球蚴囊液纯化抗原为免疫源制备单克隆抗体,共筛选了11株能高效分泌效价在1:25600～1:102400特异抗体的细胞株,抗体亚类为IgG1或IgG2a.筛选到的单克隆抗体F3B6作为标记抗体,单克隆抗体C4H6作为包被抗体制成免疫层析试条,用该试条检测127份棘球蚴病患者血清的敏感性为88.12％(112/127),其中试条检测囊型包虫病患者血清的敏感性为88.51％(77/87),检测泡型包虫病患者血清的敏感性为87.50％(35/40),试条法检测两型包虫病患者血清敏感性之间差异无统计学意义(χ2=0.03,P=0.86).与25份囊尾蚴病患者血清、10份日本血吸虫病患者血清、5份弓形虫病患者血清、5份并殖吸虫病患者血清和5份华支睾吸虫病患者血清均无交叉反应,60份健康者血清也均为阴性,总特异性为100.00％.结论 成功制备了棘球蚴囊液纯化抗原的单克隆抗体,以此单抗为基础研制出的快速诊断棘球蚴病胶体金免疫层析试条敏感性、特异性均较高.

目的 分析江西省现存血吸虫性肝纤维化患者的流行病学特征,为当地精准管理和治疗提供科学依据.方法 收集2021年江西省血吸虫性肝纤维化患者的性别、年龄、文化程度、职业、所在地流行类型和疫情类别等基本信息,通过B超检查获取患者肝纤维化分级情况,对其三间分布特征、肝纤维化程度等进行描述性分析.结果 2021年江西省共有血吸虫性肝纤维化患者17 575例,平均年龄为(64.9±12.6)岁,男女比例为1.45∶1,文化程度以初中及以下为主(96.83%,17 017/17 575),职业多为农民(90.09%,15 833/17 575),主要分布在处于传播控制的九江市(7 546例)、上饶市(7 072例)和南昌市(2 192例).肝纤维化程度为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级的患者分别占总数的36.03%(6 333/17 575)、52.38%(9 206/17 575)和11.58%(2 036/17 575).湖沼型和山丘型流行区患者肝纤维化分级均以Ⅱ级为主,分别占46.40%(4 004/8 630)和58.16%(5 202/8 945);传播控制及消除地区以Ⅱ级为主,分别占49.48%(4 109/8 305)和71.19%(4 149/5 828),传播阻断地区以Ⅰ级为主,占69.67%(2 398/3 442);不同流行类型和疫情类别地区患者肝纤维化分级构成比差异均有统计学意义(χ2=248.21,H=509.81,P均<0.05).40岁及以下患者肝纤维化分级均以Ⅰ级为主,40岁以上患者肝纤维化分级则以Ⅱ级为主,所有年龄段患者肝纤维化分级均以Ⅲ级占比最低.不同年龄组患者肝纤维化分级构成比差异有统计学意义(H=204.89,P<0.05).结论 江西省血吸虫性肝纤维化患者主要分布于传播控制地区,肝纤维化程度以Ⅰ级和Ⅱ级居多.对血吸虫病患者开展肝纤维化早期筛查、精准干预,可有效控制慢性血吸虫病发展为晚期血吸虫病例.

目的 构建经门静脉直接注射日本血吸虫虫卵诱导血吸虫肝病小鼠模型并评价其效果,为血吸虫肝病研究提供新的动物模型.方法 将15只8周龄的C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和注射虫卵组,其中对照组5只,注射虫卵组10只.第-14天将5 000个活虫卵注射至小鼠腹腔,第0天麻醉小鼠后剖开腹腔,经门静脉注入5 000个虫卵,对照组注射等体积的磷酸盐缓冲盐溶液(PBS).分别于第10天、第30天处死虫卵组小鼠各5只,第10天处死对照组小鼠,收集小鼠血清和肝组织,通过进行苏木素-伊红染色(HE染色)、马松染色(Masson染色),微孔板分光光度计法检测丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、肝脏羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,以及实时荧光定量PCR(qPCR)法检测肝纤维化相关基因、Th1和Th2型免疫反应相关基因,分析肝损伤、虫卵肉芽肿和纤维化以及适应性免疫反应等指标,评价经门静脉注射虫卵诱导血吸虫肝病小鼠模型的效果.结果 经门静脉注射虫卵10d和30d后,小鼠肝脏出现明显的虫卵肉芽肿,第10天组虫卵肉芽肿面积与第30天组相比,差异无统计学意义(t=0.975,P=0.332).Masson染色和肝脏羟脯氨酸含量检测显示肝脏发生明显纤维化.qPCR结果表明,与对照组相比,第10天组小鼠肝组织纤维化标志基因α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-Sma)、Ⅰ 型胶原(collagen type Ⅰ alpha 1,Col1 α1)、转化生长因子 β1(transforming growth factor beta 1,Tgfb1)表达水平显著升高,差异有统计学意义(t=6.380、7.533、5.314,P=0.002、0.001、0.007);在第30天时出明显下降,与对照组相比差异无统计学意义(t=0.940、1.529、1.746,P=0.778、0.543、0.457).同时,Th1型免疫反应相关基因肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,Tnf)、干扰素-γ(interferon gamma,Ifng)和 Th2 型免疫反应相关基因白细胞介素 5(interleu-kin-5,Il5)、白细胞介素 13(interleukin-13,Il13)表达水平在注射虫卵10 d后显著升高,差异有统计学意义(t=6.163、4.589、5.651、5.367,P=0.003、0.018、0.020、0.009).此外,各组小鼠血清中的AST、ALT水平无明显变化,差异无统计学意义(t=0.982、3.450,P=0.771、0.074;t=1.164、0.564,P=0.697、0.917).结论 经门静脉注射虫卵诱导血吸虫肝病小鼠模型构建成,研究结果为血吸虫病肝纤维化的机制研究提供了新的建模方法.

东方田鼠是已知的唯一一种天然抗日本血吸虫病的哺乳动物.来源于血吸虫病疫区和非疫区以及实验室培育的东方田鼠对日本血吸虫有着相同的抗性.野生东方田鼠经过30多年的实验室培育,已经实现了实验动物化.同时,研究人员对东方田鼠的生长发育、生殖生理、血清生化、血液学指标、组织解剖等生物学性状进行了较详细的研究,并且进一步深入探讨了东方田鼠的抗血吸虫病特性及机制.上海实验动物研究中心培育的洞庭湖东方田鼠封闭种群(S:DTMF)在2021年经中国实验动物学会实验动物资源与评价工作委员会认定为中国实验动物资源.本综述着重总结近10年,特别是国家科技支撑计划项目实施中在东方田鼠生物学特性、标准化、基因组以及抗血吸虫病机制等方面的研究进展.

目的 了解苏州市吴中区血吸虫病传播阻断后疫情现状和变化趋势,为制定和完善血吸虫病监测方案提供依据.方法 按照全国血吸虫病疫情监测方案对吴中区血吸虫病疫情进行监测,采取单纯随机抽样方法对吴中区各乡镇常住居民和流动人群,开展血清学间接血凝试验法(IHA)检测,血检阳性者进一步粪检(尼龙绢袋集卵孵化法或改良加藤氏法),同时对重点人群进行粪检.对2004-2019年查治病、查灭螺等数据进行分析,在此基础上进行疫情预测.结果 2004-2019年共检测185 815人次,未发现血吸虫病例.其中,2011-2019年血清学共检查本地人群52 087人次,血检阳性率为0.301％(157/52 087);流动人群20 479人次,血检阳性率为0.542％(111/20 479);2004-2019年间人群血检阳性率呈上升趋势,差异有统计学意义(Z=3.869,P＜0.001);粪检3 519人次,均阴性.共查螺3 700.870 hm2,有螺面积25.790 hm2,总体有上升趋势,以山区环境为主,主要分布在光福、东山、金庭等乡镇.共查螺55 371框,有螺框出现率为4.089％(2 264/55 371),各年间呈下降趋势,且差异有统计学意义(Z=-2.836,P=0.005).查获活螺7 900只,活螺密度0.143只/框,有下降趋势;解剖钉螺8 574只,未发现阳性钉螺.药物灭螺90.906 hm2,无显著变化趋势.2020-2024年血清阳性率、有螺框出现率和活螺密度的5年预测值分别为0.616％、0.884％和0.082只/框,各年有螺面积预测值分别为15.028、6.296、13.004、7.852和11.809 hm2.结论 当地无血吸虫病疫情,且无阳性钉螺,但有螺面积波动较大,建议加强钉螺监测.