目的 探讨甲基胞嘧啶双加氧酶2(TET2)抑制剂衣康酸对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖、迁移的影响及机制.方法 人乳腺癌细胞株MDA-MB-231分别采用二甲基亚砜(DMSO)和1、5 μmol/L衣康酸处理24 h,流式细胞术检测细胞凋亡确定可用的衣康酸浓度,免疫荧光实验检测衣康酸对细胞5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)表达水平的抑制作用,细胞计数、MTS检测衣康酸对细胞增殖和活性的影响,Transwell实验检测衣康酸对细胞迁移能力的影响,甲基化特异性实时荧光定量PCR(qPCR)检测衣康酸处理对细胞增殖、迁移相关基因启动子区甲基化的影响,qPCR检测衣康酸对细胞增殖、迁移相关基因表达的影响.结果 5 μmol/L衣康酸处理细胞对细胞凋亡均无明显影响,且可抑制5hmC表达水平(P＜0.05).细胞计数和MTS结果表明,衣康酸促进细胞增殖(增加约58％,P＜0.05),增强细胞活性(增加约42％,P＜0.05);Transwell实验结果表明,衣康酸增强细胞迁移(增加约55％,P＜0.05).甲基化特异性qPCR结果表明,衣康酸处理明显促进p21和PTEN启动子甲基化(P＜0.05).qPCR结果表明,衣康酸明显抑制p21和PTEN表达水平(P＜0.05).结论 衣康酸通过抑制p21和PTEN的5hmC水平降低其表达,促进MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖、迁移.

甲基胞嘧啶双加氧酶1(TET1)蛋白是一种5-甲基胞嘧啶(5-mC)羟化酶，属于人类α-酮戊二酸加氧酶TET蛋白家族。其功能是识别并结合到基因组5’-胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤基序(CpG)-3’二核苷酸密度高的区域如CpG岛，启动DNA去甲基化程序，维持DNA甲基化和去甲基化平衡，以保持基因组甲基化稳态，实现表观遗传调控。TET1表达和/或功能异常与肿瘤的发生和进展密切相关，在不同来源的肿瘤中可以表现为原癌基因或者抑癌基因属性。本文综述近年来TET1在肿瘤中的作用及机制的研究进展。

目的:了解不同类型氟骨症大鼠骨组织5-甲基胞嘧啶（5-mC）、5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）水平，并分析其相关性。方法:选取4周龄SPF级健康SD大鼠30只，适应性喂养1周后，采用随机数字表法将大鼠按体重（100 ~ 120 g）分为对照组（4 ml·kg -1·bw去离子水灌胃+标准维持饲料）、骨硬化组[20 mg·kg -1·bw氟化钠（NaF）灌胃+标准维持饲料]、骨质疏松/骨软化组（20 mg·kg -1·bw NaF灌胃+低钙低蛋白偏食饲料），每组10只，雌雄各半；每周灌胃6 d，实验周期为5个月。实验结束后采集大鼠心脏血、下肢股骨样本。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清甲基供体S-腺苷甲硫氨酸（SAM）及其代谢产物S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）含量，骨组织5-mC、5-hmC水平；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测大鼠骨组织DNA甲基转移酶（DNMTs），DNA羟甲基化酶（TETs）蛋白表达情况；并分析各组大鼠血清SAM含量、SAM/SAH比值与骨组织5-mC水平以及骨组织5-mC与5-hmC水平的相关性。 结果:对照组、骨硬化组、骨质疏松/骨软化组大鼠血清SAM[11.03（7.06，18.63）、3.96（2.32，9.09）、3.91（2.35，4.46）nmol/L]、SAH含量[（4.69 ± 0.55）、（5.41 ± 1.13）、（13.90 ± 1.09）ng/L]，SAM/SAH比值[2.58（1.54，4.12）、0.62（0.52，1.69）、0.14（0.13，0.15）]及骨组织5-mC[103.39（97.37，109.35）、52.50（50.19，68.13）、55.03（49.97，59.57）ng/L]、5-hmC水平[（32.61 ± 8.84）、（56.96 ± 8.48）、（20.34 ± 6.22）ng/L]比较，差异均有统计学意义（ H/ F = 12.81、284.24、21.85、19.37、55.23，均 P < 0.01）。与对照组比较，骨硬化组、骨质疏松/骨软化组血清SAM含量、SAM/SAH比值、骨组织5-mC水平及骨质疏松/骨软化组骨组织5-hmC水平均较低，而骨质疏松/骨软化组血清SAH含量和骨硬化组骨组织5-hmC水平均较高（均 P < 0.05）；与骨硬化组比较，骨质疏松/骨软化组血清SAH含量较高，而SAM/SAH比值、骨组织5-hmC水平均较低（均 P < 0.05）。Western blot检测结果显示，对照组、骨硬化组、骨质疏松/骨软化组大鼠骨组织DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、TET1、TET2蛋白表达比较，差异均有统计学意义（ F = 285.45、345.58、239.83、311.52、318.24，均 P < 0.001）；其中，骨硬化组、骨质疏松/骨软化组骨组织DNMT1、DNMT3A、DNMT3B蛋白表达均低于对照组，且骨质疏松/骨软化组均低于骨硬化组（均 P < 0.05）；骨硬化组骨组织TET1、TET2蛋白表达均高于对照组和骨质疏松/骨软化组，且骨质疏松/骨软化组均低于对照组（均 P < 0.05）。Spearman秩相关分析结果显示，对照组、骨硬化组、骨质疏松/骨软化组大鼠血清SAM含量、SAM/SAH比值与骨组织5-mC水平均呈正相关（ rs = 0.89、0.92、0.81，0.73、0.87、0.73，均 P < 0.05）；而各组大鼠骨组织5-mC水平与5-hmC水平均呈负相关（ rs = - 0.69、- 0.68、- 0.72，均 P < 0.05）。 结论:骨硬化型氟骨症大鼠骨组织5-mC水平较低、5-hmC水平较高，骨质疏松/骨软化型氟骨症大鼠骨组织5-mC、5-hmC水平均较低；不同类型氟骨症大鼠骨组织5-mC水平差异不显著，这可能与骨组织5-hmC水平存在差异有关。

目的:分析先天性色素痣（CMN）恶变的临床及组织病理特点。方法:回顾性分析空军军医大学西京皮肤医院2010年1月至2020年9月98例经临床及病理确诊的CMN恶变患者的临床表现、组织病理表现、免疫组化及基因检测结果。结果:98例CMN恶变患者中，男45例（45.9%），女53例（54.1%），就诊时年龄为4个月至85岁，中位就诊年龄47岁。皮损位于躯干34例（34.7%），四肢（不含肢端）25例（25.5%），肢端24例（24.5%），头面颈部13例（13.3%），黏膜2例（2.0%）。98例中95例（96.9%）有皮损突然明显变化史，如突然增大、新发丘疹、溃疡、瘙痒或疼痛，发生明显变化至就诊的时长为2周至5年。95例中，皮损明显变化的平均年龄为46岁，4例（4.1%）发生于18岁以前，35例（35.7%）发生于18 ~ 40岁，56例（57.1%）发生于40岁以后，55例（57.9%）原皮损突然增大，52例（54.7%）表现为溃疡，21例（22.1%）原皮损表面出现红色或黑色的丘疹或结节，4例（4.2%）表现为皮下包块，2例（2.1%）仅表现为瘙痒，1例（1.1%）仅表现为疼痛。98例中仅3例（3.1%）皮损表现为缓慢增大。85例（86.7%）发生于小型CMN，11例（11.2%）为中型CMN，2例（2.0%）为大型CMN。组织病理检查显示，98例中86例（87.8%）皮损中无残留的痣细胞，显示典型黑素瘤的特点；12例（12.2%）可见残留的痣细胞，且这12例黑素瘤细胞均表达HMB45，11例残留痣细胞不表达HMB45。7例行5-羟甲基胞嘧啶（5hmC）免疫组化染色，6例瘤细胞区域5hmC呈阴性表达，而残留痣细胞区域呈阳性表达。22例患者皮损组织标本行BRAF基因检测，其中1例为大型CMN恶变，BRAF基因检测为阴性；21例小型CMN恶变中，11例（52.4%）BRAF基因检测为阳性，10例（47.6%）为阴性。结论:CMN恶变好发于躯干，多见于大于40岁者，多有皮损突然明显变化史（如增大、丘疹、溃疡），个别皮损仅有瘙痒、疼痛；HMB45、5hmC免疫组化染色有助于鉴别黑素瘤细胞与真皮痣细胞；CMN恶变的诊断需要密切结合临床及组织病理表现。

目的:探讨十-十一易位蛋白(TETs)和5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)在食管鳞癌组织的表达及临床意义。方法:随机选取2020年1月至2022年8月于郑州大学第一附属医院进行手术治疗的食管鳞癌患者癌组织和癌旁组织(距离癌组织2～3 cm)各10例，采用高效液相-质谱联用法(LC-MS/MS)检测5hmC在食管鳞癌中的修饰水平；采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测TETs mRNA在食管鳞癌中的表达；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测TETs在食管鳞癌中的蛋白表达水平，组间比较采用 t检验。 结果:食管鳞癌组织中5hmC修饰水平显著高于食管癌癌旁组织[(0.21±0.03)%比(0.05±0.01)%， t＝3.095， P<0.01]。TCGA数据库分析，食管癌组织中TET1表达水平显著高于食管癌癌旁组织(1.48±0.08比0.22±0.05， t＝5.032， P<0.01)；TET2表达水平显著高于食管癌癌旁组织(6.12±0.32比2.86±0.45， t＝11.035， P<0.05)；TET3表达水平显著高于食管癌癌旁组织(3.69±0.46比2.46±0.55， t＝15.339， P<0.05)。RT-qPCR结果表明，食管癌组织中TET1 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(5.93±0.28比2.58±0.15， t＝15.854， P<0.05)；TET2 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(5.08±0.12比2.82±0.25， t＝14.012， P<0.05)；TET3 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(4.88±0.28比3.05±0.17， t＝12.715， P<0.05)。Western blot结果表明，TET2蛋白表达水平显著高于食管癌癌旁组织(2.86±0.45比1.00±0.00， t＝7.895， P<0.01)；TET3 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(2.57±0.26比1.00±0.00， t＝8.331， P<0.01)。 结论:食管鳞癌组织中5hmC表达水平高于癌旁组织，癌组织中TET2及TET3 mRNA及蛋白水平均呈高表达。

目的 明确高含S-腺苷甲硫氨酸(SAM)饮食是否通过激活 10-11 易位蛋白 3(TET3)促进DNA去甲基化,抑制脑卒中后小鼠神经元细胞的凋亡及活性氧(ROS)产生.方法 将C57BL/6J小鼠分为Sham组、大脑中动脉栓塞(MCAO)组和SAM组.术后行Morris水迷宫实验评价小鼠神经功能状态,对小鼠脑组织进行取材、切片、苏木精-伊红染色、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色及免疫荧光染色.将PC-12 细胞分为Control组、缺氧/复氧(H/R)组和SAM组.流式细胞仪检测细胞ROS水平及凋亡水平;Western blot检测细胞中TET3 相对表达量;Dot blot检测细胞内 5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)水平.结果 在动物实验中,与Sham组相比,MCAO组小鼠神经功能缺损加重,脑梗死区域明显,脑组织结构排列紊乱且存在大量空洞,神经细胞数量减少,脑切片中TET3 蛋白表达减少,5hmC水平降低;而与MCAO组相比,SAM组小鼠神经功能缺损情况减轻,脑梗死区域体积减小,脑组织中的空洞减少,存活神经细胞增多,TET3 蛋白表达增多,5hmC水平升高.在细胞实验中,与Control组相比,H/R组缺氧处理可促使细胞内产生大量ROS,诱导细胞发生凋亡,胞内TET3 蛋白表达减少和 5hmC水平下降;而与H/R组相比,SAM组细胞ROS产生减少,细胞凋亡减少,TET3 表达增多和 5hmC水平上升.给予TET3 抑制剂可消除SAM减少细胞凋亡的作用.结论 高含SAM饮食通过促进TET3 介导的DNA去甲基化减轻小鼠脑卒中后神经元损伤,从而发挥保护作用.

RNA修饰作为调控RNA功能的一种高度特异性和高效率的方法,近年来已成为表观遗传学领域主要研究方向之一.目前已有100多种不同类型的RNA修饰被发现,包括RNA编辑、剪接、5-帽子和转录内修饰等不可逆修饰及甲基化、羟基化等可逆修饰,二者均在调节RNA功能中起着关键作用.在甲基化修饰中,针对N1-甲基腺嘌呤(m1A)、5-甲基胞嘧啶(m5C)、N6-甲基腺嘌呤(m6A)和N7-甲基鸟嘌呤(m7G)等的研究相对较多,其中m7G修饰是指发生在RNA鸟嘌呤第7个N原子上的甲基化修饰,存在于tRNA、miRNA和内部mRNA中[1],在RNA加工、代谢和功能方面起关键作用,并参与胚胎干细胞的自我更新及分化、干细胞多能分化、血管生成等多种生理功能的调控[2].

砷是一种天然类金属化学元素,是世界卫生组织公布的引起重大公共关注的 10种危害环境与健康的化学品之一,可以通过呼吸、食物、饮水、皮肤等途径进入人体,长期接触砷会导致多器官癌症和多系统功能受损.表观遗传学机制在砷健康效应中发挥重要作用,研究表明,砷的致癌性可能是由表观遗传变化引起的.之前的研究主要集中在砷对DNA甲基化修饰的影响.近年来,研究表明DNA主动去甲基化的中间产物——5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC),可作为一种敏感的表观遗传标记,在砷暴露与健康效应之间发挥至关重要的"桥梁"作用.本文基于DNA羟甲基化在砷暴露所致健康效应中作用的最新研究进展,简述了砷暴露的健康效应与DNA羟甲基化的关系,总结了DNA羟甲基化在砷暴露所致健康效应中的可能作用机制,为防治砷暴露所致健康效应提供科学依据.

目的 探讨十-十一易位蛋白(TETs)和5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)在食管鳞癌组织的表达及临床意义.方法 随机选取2020年1月至2022年8月于郑州大学第一附属医院进行手术治疗的食管鳞癌患者癌组织和癌旁组织(距离癌组织2～3 cm)各10例,采用高效液相-质谱联用法(LC-MS/MS)检测5hmC在食管鳞癌中的修饰水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测TETs mRNA在食管鳞癌中的表达;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测TETs在食管鳞癌中的蛋白表达水平,组间比较采用t检验.结果 食管鳞癌组织中5hmC修饰水平显著高于食管癌癌旁组织[(0.21±0.03)％比(0.05±0.01)％,t=3.095,P＜0.01].TCGA 数据库分析,食管癌组织中TET1表达水平显著高于食管癌癌旁组织(1.48±0.08比0.22±0.05,t=5.032,P＜0.01);TET2表达水平显著高于食管癌癌旁组织(6.12±0.32比2.86±0.45,t=11.035,P＜0.05);TET3表达水平显著高于食管癌癌旁组织(3.69±0.46比2.46±0.55,t=15.339,P＜0.05).RT-qPCR结果表明,食管癌组织中TET1 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(5.93±0.28比2.58± 0.15,t=15.854,P＜0.05);TET2 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(5.08±0.12比2.82± 0.25,t=14.012,P＜0.05);TET3 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(4.88±0.28比3.05± 0.17,t=12.715,P＜0.05).Western blot结果表明,TET2蛋白表达水平显著高于食管癌癌旁组织(2.86±0.45比1.00±0.00,t=7.895,P＜0.01);TET3 mRNA表达水平显著高于食管癌癌旁组织(2.57±0.26比1.00±0.00,t=8.331,P＜0.01).结论 食管鳞癌组织中5hmC表达水平高于癌旁组织,癌组织中TET2及TET3 mRNA及蛋白水平均呈高表达.

肿瘤与人体内铜离子稳态失衡密切相关.为了开发高效低毒的新型铜离子螯合剂类抗肿瘤化合物,以2-甲基-8-羟基喹啉为起始物,经过C-2位羟醛缩合、消除反应、迈克尔加成等反应合成5种8-羟基喹啉衍生物.通过紫外滴定法研究目标化合物的铜离子螯合能力和选择性;通过MTT法测定其对人黑色素瘤细胞(A375细胞和Colo829细胞)、人肺癌细胞(A549细胞)、人肝癌细胞(HepG2细胞)、人宫颈癌细胞(HeLa细胞)及人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)的细胞毒性.最终,得到安全性高于阳性对照品氟尿嘧啶(5-FU)的TDMQ51和TDMQ53这2个化合物,对铜和锌的络合常数相差达13个数量级,且对多种肿瘤细胞具有良好抑制活性,在提高抗肿瘤活性上具有改造潜力,可作为先导化合物进行深入研究.