目的:探究血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)联合尿液肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)在2型糖尿病(T2DM)患者合并早期肾损伤中的诊断价值。方法:根据24 h尿白蛋白排泄率(UAER)将2016年5月至2017年11月由本院确诊收治的90例T2DM患者分为T2DM组(无早期肾损伤，46例)及T2DM合并肾损伤组(合并早期肾损伤，44例)，另选取同期50例健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组患者的血清RBP4、尿L-FABP水平，并检测患者的血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)、脂蛋白(a)[Lp(a)]等肾功能指标水平，分析RBP4、L-FABP与各肾功能指标间的相关性，另应用受试者工作特征(ROC)曲线分析RBP4、L-FABP对T2DM合并早期肾损伤的诊断价值。结果:T2DM合并肾损伤组患者的血清Scr、BUN、Cys-C、Lp(a)水平均显著高于T2DM组及对照组(均 P<0.05)，且T2DM组的上述各指标水平均显著高于对照组(均 P<0.05)；T2DM合并肾损伤组患者的血清RBP4、尿L-FABP水平均显著高于T2DM组及对照组(均 P<0.05)，且T2DM组的血清RBP4、尿L-FABP水平均显著高于对照组(均 P<0.05)；T2DM合并肾损伤组患者的血清RBP4、尿L-FABP均与Scr、BUN、Cys-C、Lp(a)水平呈正相关(均 P<0.05)；ROC曲线分析显示，血清RBP4、尿L-FABP诊断T2DM合并早期肾损伤的截断值分别为59.34 ng/mL、6.12 μg·[(g·Cr)] -1，曲线下面积(AUC)分别为0.828、0.753，两者联合诊断效能最优，AUC为0.874。 结论:T2DM合并早期肾损伤患者的血清RBP4、尿L-FABP水平显著上升，两者联合检测有利于T2DM合并早期肾损伤的诊断。

目的:探讨血清骨桥蛋白(OPN)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)与糖尿病肾病(DN)患者肾功能及骨密度的关系。方法:选取2020年1月至2021年12月在济宁医学院附属医院确诊的120例DN患者作为DN组，60例单纯糖尿病患者作为T2DM组，糖耐量试验正常的研究对象60例作为对照组，对比三组的血糖、血清OPN、BMP2、RBP4、腰椎骨密度(LBMD)、股骨颈骨密度(FNBMD)及肾功能指标，并按照DN患者的尿白蛋白排泄率(UAER)将患者分为微量白蛋白尿DN组(71例)和大量白蛋白尿DN组(49例)，进行分层对比，采用简单线性相关分析法分析DN患者OPN、BMP2、RBP4与肾功能及骨密度指标的相关性。结果:DN组患者的空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA 1c)、血肌酐(Scr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、胱抑素(CysC)水平显著高于T2DM组和对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；T2DM组FPG、HbA 1c高于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；DN组患者的OPN、BMP2高于T2DM组和对照组，DN组的RBP4、LBMD、FNBMD低于T2DM组和对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；T2DM组的OPN、BMP2高于对照组，RBP4低于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；大量白蛋白尿DN组患者的FPG、HbA 1c、Scr、UAER、CysC水平显著高于微量白蛋白尿DN组患者，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；大量白蛋白尿DN组患者的OPN、BMP2高于微量白蛋白尿DN组患者，大量白蛋白尿DN组患者的RBP4、LBMD、FNBMD低于微量白蛋白尿DN组患者，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。DN组患者的OPN与Scr、UAER、CysC均呈正相关(均 P<0.05)，BMP2与UAER、CysC均呈正相关(均 P<0.05)；DN组患者的OPN、BMP2与LBMD、FNBMD均呈负相关(均 P<0.05)，RBP4与LBMD、FNBMD均呈正相关(均 P<0.05)。 结论:OPN、BMP2、RBP4与DN患者肾功能受损程度及骨量丢失密切相关，可在一定程度上反映T2DM患者骨代谢及骨质疏松病情程度。

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是目前最常见的慢性肝病，其特点是肝脏内脂肪大量堆积(脂肪变性)。肝细胞因子指由肝脏分泌的具有自分泌、旁分泌或内分泌活性的蛋白质，主要功能为调节脂质和葡萄糖代谢。研究发现，在发生肝脏脂肪变性时，许多肝细胞因子的表达会发生变化，包括成纤维细胞生长因子21、性激素结合球蛋白、adropin、血管生成素样蛋白8、胎球蛋白A、视黄醇结合蛋白4、hepassocin、硒蛋白P和白细胞衍生趋化因子2等，它们抑制或者促进NAFLD的形成，在该过程中发挥重要作用。

目的:通过蛋白重组技术低成本、快速制备高浓度人视黄醇结合蛋白4（hRBP4）参考物质，解决临床hRBP4高值参考物质难以获取的需求。方法:在美国国立生物技术信息中心NCB查找hRBP4的互补DNA序列，经大肠埃希菌密码子优化后人工合成，然后将DNA片段克隆至原核表达质粒pET-28a（+）中，以构建重组hRBP4表达载体。将重组质粒转化至 E. coli BL21感受肽中，优化诱导表达条件（如温度、转速和异丙基硫代半乳糖苷IPTG浓度等）、诱导质粒表达并对重组蛋白进行His融合标签纯化，获取纯化后的hRBP4重组蛋白。 结果:DNAMAN软件对比显示编码hRBP4蛋白的碱基序列完全正确，成功构建重组hRBP4原核表达质粒；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示亲和纯化产物中可清晰可见约相对分子质量26 000电泳条带；临床尿液和血清hRBP4常规检测系统均可检测到纯化的hRBP4蛋白，且稀释倍数与检测浓度间呈现良好线性关系。结论:成功构建重组hRBP4高水平表达系统，重组hRBP4蛋白纯度大、浓度高、生产周期短，有望在室间质量评价质控品和有证参考物质研制中发挥重要作用。

目的:探讨老年2型糖尿病(T2DM)患者血清视黄醇结合蛋白(RBP)与代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)发病的关系及可能代谢机制。方法:回顾性分析2003年1月至2012年12月在上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科住院且临床资料完整的老年T2DM患者3 384例。根据血清RBP水平四分位数分为4组：RBP<35 mg/L组844例、35 mg/L≤ RBP ≤41 mg/L组773例、42 mg/L≤ RBP ≤51 mg/L组902例和RBP>51 mg/L组865例。收集患者临床资料、实验室检查结果，比较4组患者MAFLD的患病率，采用二元Logistic回归分析RBP与MAFLD的关系。结果:校正年龄、性别后，从RBP<35 mg/L组至RBP>51 mg/L组，老年T2DM患者的肥胖比例( χ2＝15.222)、降脂药用药比例( χ2＝88.552)、收缩压( F＝12.002)、舒张压( F＝6.872)、腰围( F＝9.563)、腰臀比( F＝7.972)、体质指数( F＝9.057)、血肌酐( χ2＝185.445)、血尿酸( χ2＝314.691)、24 h尿白蛋白( χ2＝91.012)、谷丙转氨酶( χ2＝17.049)、γ-谷氨酰转肽酶( χ2＝50.514)、总胆固醇( F＝45.669)、三酰甘油( χ2＝361.269)、低密度脂蛋白胆固醇( F＝8.772)、空腹C肽( χ2＝165.756)、餐后2 h C肽( χ2＝120.690)、胰岛抵抗指数(HOMA2-IR)( χ2＝148.884)均呈上升趋势(均 P<0.01)，MAFLD患病率也逐渐升高，分别为26.5%(224/844)、30.1%(233/773)、36.6%(330/902)和41.8%(362/865)( χ2＝52.526， P<0.01)。伴MAFLD的老年T2DM患者HOMA2-IR高于不伴MAFLD患者[2.0(1.31~2.8)比1.39(0.86~2.06)， F＝220.826， P<0.01]。校正其他混杂因素后，二元Logistic回归分析结果显示，血清RBP与MAFLD发生相关( β＝0.209， OR＝1.232，95% CI：1.079~1.408， χ2＝9.441， P<0.01)。 结论:血清RBP水平升高是老年T2DM患者MAFLD发生的独立危险因素，其机制可能与RBP增加胰岛素抵抗有关。

目的:基于SYNTAX评分分析人视黄醇结合蛋白4(RBP4)、miR-1-3p、重组人维生素D结合蛋白(VDBP)与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)病情严重程度的相关性及对其的诊断价值.方法:选择2020年1月至2021年6月入住我院接受治疗的162例STEMI患者(STEMI组),另选取同期在我院接受体检的67例健康受试者作为健康对照组.根据SYNTAX评分,STEMI组被进一步分为低危组(68例,＜22分)、中危组(53例,23分≤SYNTAX评分≤32分)和高危组(41例,＞33分).比较上述各组RBP4、VDBP水平和miR-1-3p表达水平,分析上述指标单独及联合检测对STEMI患者病情严重程度的诊断价值,分析STEMI患者SYNTAX评分与上述指标的相关性.结果:与健康对照组比较,STEMI组RBP4[(47.18±5.24)μg/L比(81.40±6.11)μg/L]、VDBP[(2.36±0.75)μg/ml 比(3.55±1.04)μg/ml]水平显著升高,miR-1-3p 表达[(1.18±0.13)比(0.72±0.07)]显著降低(P均＜0.001).与低危组比较,中危组和高危组的RBP4[(69.97±2.98)μg/L比(85.23±3.76)μg/L 比(95.41±3.16)μg/L]、VDBP[(3.19±0.50)μg/ml 比(3.55±0.52)μg/ml 比(4.16±0.64)μg/ml]水平显著升高,miR-1-3p 表达[(0.80±0.05)比(0.70±0.04)比(0.61±0.03)]显著降低,且高危组的RBP4和VDBP水平显著高于中危组,miR-1-3p表达显著低于中危组(P均＜0.001).ROC曲线分析显示上述指标联合检测的曲线下面积(AUC)为0.892,显著高于各单独检测(Z=4.787、3.078、2.495,P＜0.05或＜0.01).Spearman相关分析显示,STEMI病情严重程度与RBP4、VDBP水平呈显著正相关(r=0.849、0.776,P 均＜0.001),与 miR-1-3p 呈显著负相关(r=-0.790,P＜0.001).结论:RBP4、VDBP 水平及miR-1-3p表达水平能够反映STEMI患者的病情严重程度,三项联合检测对病情严重程度具有较高的诊断效能,可作为临床重要的观察指标来评估患者病情.

视黄醇是维生素A的主要活性形式之一,对于机体的生长发育、眼部和皮肤功能维持至关重要,被广泛应用于化妆品、医药和饲料添加领域.动物体内不具备完整的维生素A合成途径,但可通过膳食直接摄入或将膳食中获得的β-胡萝卜素转化获得.为了推进视黄醇的生物法合成研究,首先以β-胡萝卜素合成平台CAR?1 为基础,筛选了 3 种不同来源的醇脱氢酶,确定了大肠杆菌来源的ybbO具有最高的催化活性,转化率可达 95.6%.为了进一步提高反应速率和产量,采用蛋白质融合技术将视黄醇合成模块中 2 个相邻酶blh和ybbO进行融合后,在高产β-胡萝卜素工程菌株CAR?3 中进行评估,获得了最优组合blh-GGGS-ybbO,其产量较融合前提高了 44.9%,达到(111.1±3.5)mg·L-1.进一步工作中,通过引入人源的视黄醇结合蛋白(RBP4)以及转甲状腺素蛋白(TTR),在酿酒酵母中模拟了人体肝脏细胞分泌视黄醇的过程,视黄醇产量增加至(158.0±13.1)mg·L-1.最后,采用过表达INO2 扩张β-胡萝卜素合成途径反应区室,提高血红蛋白VHb表达量以增强氧气的供给,强化PDR3m表达促进视黄醇的转运和开发 2 个阶段发酵工艺等方法,在 5 L发酵罐中成功将视黄醇的产量提升至(2 320.0±26.0)mg·L-1,为视黄醇产业化发展提供了重要基础.

[目的]探讨冠心病患者血清脂滴蛋白-5(perilipin-5)、视黄醇结合蛋白-4(RBP-4)、成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)水平变化及其与冠状动脉狭窄程度的相关性.[方法]选取2020年5月至2023年1月两院收治的142例冠心病患者(观察组),另选取100例同期体检的健康志愿者作为对照组.比较两组血清perilipin-5、RBP-4、FGF-23水平,比较不同冠心病类型、病变支数、狭窄程度患者血清perilipin-5、RBP-4、FGF-23水平,分析血清peril-ipin-5、RBP-4、FGF-23与病变支数、狭窄程度的相关性及对狭窄程度的诊断价值.[结果]观察组血清RBP-4、FGF-23 水平高于对照组,血清perilipin-5水平低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).稳定性心绞痛患者血清perilipin-5水平高于不稳定型心绞痛、急性心肌梗死患者,血清RBP-4、FGF-23水平低于不稳定型心绞痛、急性心肌梗死患者,差异有统计学意义(P＜0.05).轻度狭窄患者血清perilipin-5水平高于中度狭窄、重度狭窄患者,血清RBP-4、FGF-23水平低于中度狭窄、重度狭窄患者,差异有统计学意义(P＜0.05).单支病变患者血清perilip-in-5 水平高于双支病变、多支病变患者,血清RBP-4、FGF-23水平低于双支病变、多支病变患者,差异有统计学意义(P＜0.05).Spearman相关性分析,血清perilipin-5与病变支数、狭窄程度呈负相关,RBP-4、FGF-23与病变支数、狭窄程度呈正相关.受试者工作特征曲线分析显示,血清perilipin-5、RBP-4、FGF-23联合诊断冠心病狭窄程度的AUC为0.819,优于各单一指标诊断(P＜0.05).[结论]血清perilipin-5、RBP-4、FGF-23水平变化与冠心病患者病情显著相关,三者联合诊断有助于实现疾病危险分层.

目的 探讨母体葡萄膜炎暴露对子代小鼠受光感受器间视黄醇结合蛋白(interphotoreceptor retinoid-binding protein,IRBP)诱导的实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)免疫效应的影响.方法 从本课题组前期获得的受双亲EAU暴露的子代C57BL/6J小鼠眼球的RNA测序转录组数据中,筛选免疫相关差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs).利用基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)的富集分析,确定这些免疫相关的差异表达基因生物学途径.通过蛋白质互作网络(protein-protein interaction networks,PPI)分析交集基因以此鉴定出枢纽基因.进一步通过荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qPCR)确定筛选出的异常表达的枢纽基因是否也在受母体葡萄膜炎影响的子代小鼠中差异表达,最后通过视网膜抗原IRBP651-670 诱导受母体活动期炎症影响的子代以评价母体葡萄膜炎对子代患葡萄膜炎的易感性以及相关免疫效应的影响.结果 从受双亲葡萄膜炎影响的子代小鼠眼球组织中鉴定出 72 个免疫相关差异基因.这些基因主要富集参与Toll样受体信号通路、MAPK信号通路以及B细胞受体信号通路等.进一步进行PPI网络互作分析,筛选出proteasome 26S subunit,ATPase 5(Psmc5)、proteasome 26S subunit,ATPase 3(Psmc3)、proteasome 26S subunit ubiquitin receptor,non-ATPase 4(Psmd4)和proteasome 26S subunit,non-ATPase 8(Psmd8)这4 个枢纽基因.qPCR检测证实受母体葡萄膜炎影响的子代小鼠中也上调表达这 4 个枢纽基因.而且与健康子代相比,150 μg IRBP 抗原诱导可增加受活动期炎症影响的子代EAU临床表现的严重程度和病理组织学损伤(P=0.0087,P=0.0410);另外,受母体活动期炎症影响的子代在IRBP诱导的 EAU 中脾 T 细胞增殖功能增强,其血清中产生的细胞因子 IL-17 和 IL-6 增加(P=0.0450,P=0.0300).结论 母体活动性炎症暴露加剧子代小鼠受IRBP诱导的EAU疾病的严重性,增强抗原特异性T细胞增殖以及血清中IL-17、IL-6的产生,可能与受影响的子代上调表达的4个枢纽基因Psmc5、Psmc3、Psmd4、Psmd8相关.

目的 探讨基质交感分子 1(matrix sympathetic molecule 1,STIM1)、视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)在高血压肾病患者血清中的表达水平,分析其诊断价值.方法 选取2020年 3月至 2021年 3月三二O一医院收治的高血压肾病患者 88例为高血压肾病组,单纯高血压患者 88例为高血压组,另外选取同期体检健康者 88名为健康组.采用酶联免疫法检测血清STIM1和RBP4水平;Pearson法分析血清STIM1和RBP4水平的相关性及其与血压、肾功能指标的相关性;Logistic回归分析高血压肾病的影响因素;受试者工作特征曲线分析血清STIM1、RBP4水平对高血压肾病的诊断价值.结果 高血压肾病组尿素氮[(8.26±3.37)mmol/L比(5.46±2.31)mmol/L、(5.63±2.54)mmol/L]、尿酸[(375.53±71.41)μmol/L比(342.80±59.75)μmol/L、(352.68±65.24)μmol/L]、血肌酐[(105.34±34.19)μmol/L比(68.31±20.19)μmol/L、(71.63±22.55)μmol/L]显著高于健康组和高血压组(P＜0.05),估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)显著低于健康组和高血压组(P＜0.05);健康组、高血压组、高血压肾病组血清STIM1[(30.61±6.25)μg/L、(36.63±8.27)μg/L、(48.10±11.06)μg/L]、RBP4[(42.26±5.23)ng/mL、(51.98±8.70)ng/mL、(66.61±13.79)ng/mL]水平显著依次增高,两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);高血压肾病组血清中STIM1、RBP4的水平呈正相关;高血压肾病组血清STIM1、RBP4水平与尿素氮、尿酸、血肌酐呈正相关,与eGFR呈负相关(P均＜0.05);Logistic多因素回归分析得知STIM1高表达、RBP4高表达、血肌酐、eGFR是影响高血压患者发生高血压肾病的独立危险因素(P＜0.05);血清STIM1、RBP4诊断高血压患者发生高血压肾病的曲线下面积为 0.798、0.744,二者联合诊断高血压肾病的曲线下面积为0.852,灵敏度为 75.29%,特异度为 88.21%,二者联合优于血清STIM1、RBP4各自单独诊断(Z联合vsSTIM1 = 2.219、Z联合vsRBP4 = 3.385,P均＜0.05).结论 血清STIM1、RBP4水平在高血压肾病患者中呈现高表达,二者联合对于高血压肾病具有一定诊断价值.