通过体内和体外实验方法观察依诺肝素对野百合碱导致肝窦阻塞综合征(HSOS)的治疗及其可能机制。结果显示，野百合碱可导致大鼠HSOS，并降低大鼠肝窦内皮细胞的存活率。与野百合碱比较，依诺肝素治疗可减轻野百合碱所致HSOS大鼠的肝窦阻塞，并可提高肝窦内皮细胞的存活率。此外，野百合碱可使大鼠肝脏、肝窦内皮细胞中Slit2、Robo4蛋白质和mRNA表达下降，但依诺肝素能够上调野百合碱所致HSOS大鼠肝脏、肝窦内皮细胞中Slit2、Robo4蛋白质和mRNA的表达。

目的:评价七氟烷对肺动脉高压大鼠右心室重构时心肌细胞Ca 2＋转运蛋白表达的影响。 方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠24只，8～10周龄，体质量200～250 g，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：对照组(CM组)、七氟烷组(CS组)、野百合碱组(M组)和七氟烷＋野百合碱组(S组)。M组和S组大鼠腹腔注射野百合碱60 mg/kg，CM组大鼠腹腔注射野百合碱溶解剂。注射野百合碱后第1天时S组和CS组大鼠吸入2.5%七氟烷1 h，每周2次，每次间隔3 d。野百合碱注射后6周应用小动物经胸超声心动图法测定肺动脉加速时间和肺动脉射血时间。在3%七氟烷麻醉下暴露小鼠胸腔，灌注心脏，留取肺动脉分支血管和右心室心肌组织。HE染色观察肺小动脉管壁厚度和右心室心肌细胞横截面积，Western blot法检测右心室心肌细胞Ca 2＋转运蛋白的表达。 结果:与CM组相比，M组大鼠肺动脉加速时间和肺动脉射血时间比值减小，右心室心肌细胞横截面积增大，肺小动脉管壁厚度增加，1型钠钙交换体和三磷酸肌醇受体表达上调，L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基、兰尼碱受体、肌浆网钙泵2α和亲联蛋白-2表达下调( P<0.01)；与M组相比，S组大鼠肺动脉加速时间和肺动脉射血时间比值升高，右心室心肌细胞横截面积减小，肺小动脉管壁厚度减少，1型钠钙交换体和三磷酸肌醇受体表达下调，L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基、兰尼碱受体、肌浆网钙泵2α和亲联蛋白-2表达上调( P<0.01)。 结论:七氟烷改善肺动脉高压大鼠右心室重构的机制与调节心肌细胞Ca 2＋转运蛋白表达有关。

目的:探究桥粒斑蛋白(DSP)在肺动脉高压(PH)大鼠模型与人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)的表达变化及其在PH发生、发展中的作用。方法:24只SPF级别雄性SD大鼠运用随机数字表法随机分为正常对照(NC)组、野百合碱(MCT)组、低氧(HYP)组及低氧联合Sugen5416(SuHx)组，检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数(RVHI)，观察各组大鼠血管增厚程度；蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠中肺组织中DSP的表达情况。体外培养hPASMCs，分别用转化生长因子β1(TGF-β1)或HYP处理细胞24、48、72 h，Western blot检测各组细胞中DSP表达情况。采用小分子siRNA DSP干扰序列及阴性对照序列分别转染hPASMCs，分为DSP干扰(siDSP)组及阴性对照(siNT)组。2组均进行TGF-β1、CoCl 2或HYP处理48 h，Western blot检测增殖分化及凋亡相关蛋白[p-p38、增殖相关蛋白(PCNA)、抗凋亡蛋白(Bcl2)、促凋亡蛋白(Bax)]的表达情况，划痕实验检测细胞的迁移能力变化，EdU细胞增殖流式检测细胞增殖能力变化。 结果:MCT组、HYP组、SuHx组DSP表达量[(3.10±0.59)、(4.34±0.75)、(3.84±0.13)]较NC组(1.00±0.19)升高，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。TGF-β1 24 h组、HYP 72 h组hPASMCs的DSP蛋白表达分别较TGF-β1 0 h组及HYP 0 h组升高[(4.42±0.35)比(1.00±0.07)、(2.62±0.32)比(1.00±0.21)]，差异均有统计学意义( P值均<0.01)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl 2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的p-p38表达量较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl 2组、siNT+HYP组升高[(2.14±0.20)比(1.00±0.14)、(1.66±0.09)比(1.00±0.12)、(3.03±0.22)比(1.00±0.50)]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。siDSP+HYP组中hPASMCs的PCNA表达量较siNT+HYP组下降[(0.55±0.04)比(1.00±0.04)]，差异有统计学意义( P值<0.05)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl 2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的Bcl2/Bax比值较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl 2组、siNT+HYP组下降[(0.85±0.06)比(1.00±0.04)、(0.73±0.08)比(1.00±0.07)、(0.72±0.01)比(1.00±0.05)]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞迁移率较siNT+TGF-β1组减少[(27.56±2.44)%比(58.05±2.25)%]，差异有统计学意义( t＝9.20， P<0.001)；siDSP+CoCl 2组hPASMCs的细胞迁移率较siNT CoCl 2组减少[(25.78±2.55)%比(47.30±2.10)%]，差异有统计学意义( t＝6.53， P<0.001)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+TGF-β1组减少[(6.07±0.23)%比(10.62±0.50)%]，差异有统计学意义( t＝8.29， P＝0.001)；siDSP+HYP组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+HYP组减少[(2.84±0.46)%比(5.56±0.46)%]，差异有统计学意义( t＝4.17， P＝0.014)。 结论:DSP能够促进hPASMCs的增殖和迁移，促进肺血管的重构，在PH的发生、发展起重要作用。

目的:初步探讨带孔房间隔分流器治疗肺动脉高压犬模型的短期疗效。方法:健康雄性比格犬36只，犬龄1~2岁，采用简单随机抽样法分为经导管球囊扩张房间隔造口术（BAS）+分流器组、BAS组和无造口组3组，每组12只。在犬右心房内注射脱氢野百合碱（1.5 mg/kg），建立肺动脉高压模型。建模成功后，BAS+分流器组犬行BAS，术后置入带孔房间隔分流器，BAS组犬行球囊扩张房间隔造口术，无造口组犬不予任何干预。于建模前，建模后2个月，手术治疗后1、3、6个月，分别测量各组犬的血流动力学指标及血N末端B型利钠肽原（NT-proBNP）水平。于手术治疗后1、3、6个月对BAS组和BAS+分流器组犬行超声心动图检查，观察分流器及房间隔造口的开通情况。于手术治疗后1、3、6个月各组分别处死3只犬，取心脏房间隔组织及房间隔分流器进行大体观察，观察分流器内皮化情况；取肺组织进行苏木素-伊红（HE）染色，观察肺中小血管附近炎症细胞浸润以及肺血管内膜增厚和狭窄的情况。结果:2只犬在建模后24 h内死亡，剩余34只犬，其中BAS+分流器组12只、BAS组11只、无造口组11只。与BAS组比较，BAS+分流器组犬手术治疗后3个月平均右心房压力（mRAP）和NT-proBNP较低（ P均<0.05），手术治疗后6个月心输出量（CO）较高、动脉血氧饱和度（SaO 2）较低（ P均<0.05）。与无造口组比较，BAS+分流器组犬手术治疗后1、3和6个月mRAP和NT-proBNP较低（ P均<0.05），手术治疗后6个月CO较高、SaO 2较低（ P均<0.05）。与无造口组比较，BAS组犬手术治疗后1个月mRAP和NT-proBNP较低（ P均<0.05），手术治疗后3、6个月mRAP、NT-proBNP差异无统计学意义（ P均>0.05）。超声心动图检查结果示，手术治疗后1个月BAS组犬房间隔存在极细束右向左分流，手术治疗后3个月BAS组所有犬的造口基本闭合，手术治疗后1、3、6个月BAS+分流器组犬的分流器处仍存在明显右向左分流，分流器成形良好。大体观察结果示，手术治疗后1个月BAS组犬房间隔处有明显穿刺孔，但手术治疗后3个月时房间隔穿刺孔闭合；手术治疗后6个月BAS+分流器组犬分流器表面内皮化进程良好，边缘无血栓形成。HE染色结果示，无造口组犬肺血管内膜明显增厚，肺血管狭窄，肺泡组织塌陷，周围有大量炎症细胞浸润，肺微小血管闭塞、机化，手术治疗6个月后BAS+分流器组犬肺血管内膜厚度与无造口组相仿。 结论:采用带孔房间隔分流器治疗肺动脉高压犬模型具有长期维持造口开放的优点，疗效优于单纯球囊扩张。

目的:探讨藻蓝蛋白改善肺动脉高压(PAH)大鼠肺血管重构的机制。方法:将30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，采用随机数表法分为3组：正常对照组(对照组)、PAH模型组(PAH组)、藻蓝蛋白治疗组(治疗组)，每组10只。腹腔注射野百合碱(MCT)建立PAH模型，治疗组在造模后第15天给予藻蓝蛋白灌胃，持续14d。测量右心室收缩压(RVSP)，计算右心室肥厚指数(RVHI)。苏木精-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察肺血管，蛋白印迹法(Western blot)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、核转录因子-κB(NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、天冬氨酸特异半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、α-肌动蛋白(α-SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)表达，免疫荧光定位α-SMA和PCNA。多组比较采用单因素方差分析。结果:治疗组RVSP、RVHI低于PAH组[(24.60±3.33) mmHg比(40.49±3.76) mmHg， F＝140.998， P<0.01；(32.23±2.99)%比(43.45±3.10)%， F＝90.774， P<0.01]，肺小动脉中膜厚度及中膜面积百分比低于PAH组(0.579±0.013比0.736±0.023， F＝251.494， P<0.01；0.574±0.063比0.917±0.036， F＝84.346， P<0.05，肺血管胶原沉积低于PAH组[(9.81±0.66)%比(23.23±2.05)%， F＝294.181， P<0.01]。治疗组TGF-β1、bcl-2、α-SMA和PCNA相对表达量、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)/NF-κB低于PAH组(0.813±0.077比1.097±0.056， F＝75.485， P<0.01；0.902±0.030比1.231±0.123， F＝52.224， P<0.01；1.089±0.044比1.283±0.049， F＝85.388， P<0.01；1.218±0.008比1.673±0.139， F＝33.825， P<0.05；0.463±0.025比0.875±0.013， F＝447.19， P<0.01)；bax、Caspase-3相对表达量高于PAH组(1.188±0.072比0.738±0.048， F＝63.635， P<0.01；1.750±0.028比1.432±0.017， F＝31.684， P<0.01)。治疗组α-SMA、PCNA荧光强度低于对照组。 结论:藻蓝蛋白可通过抑制肺血管胶原沉积，减少炎性因子表达，抑制细胞增殖，促进凋亡，减轻大鼠PAH肺血管重构。

目的:初步探索吡咯里西啶生物碱（PAs）相关性肝损害的血液系统变化。方法:回顾性分析复旦大学附属中山医院2012-2019年间收治的77例药物性肝损害患者的一般情况、肝功能血生化检测、血常规、凝血功能指标等，并根据服药史将患者分为PA组、其他中药组和西药组。同时建立野百合碱诱导肝损害小鼠模型，观察小鼠肝功能、肝组织HE染色和血常规各项指标的改变。结果:服用PA患者24例，服用其他中药患者24例，服用西药患者29例。PA组患者丙氨酸转氨酶较其余两组患者低（ P < 0.05），总胆红素和直接胆红素均显著低于其他中药组患者（ P < 0.05）。PA组患者外周血小板计数为（84.11±26.91）×10 9/L，显著低于正常下限，且与其他中药组和西药组患者血小板计数存在统计学差异（ P < 0.01）。PA组患者血小板压积、平均血小板体积和血小板分度与其他两组存在统计学差异（ P < 0.05）。PA组患者D-二聚体为（2.62±1.93）mg/L，高于正常值上限，且显著高于其他两组患者的D-二聚体水平（ P < 0.01）；同时PA组患者凝血酶原时间较其他两组延长（ P < 0.01）。在野百合碱诱导肝损害小鼠模型中可以观察到小鼠在出现丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶升高后，出现血小板明显下降（ P < 0.01）。 结论:PA相关性肝损害外周血小板降低，此类患者外周血小板计数较其他类型药物性肝损害患者低。PA相关性肝损害患者D-二聚体明显升高，提示潜在血栓形成风险。

目的:建立野百合碱、倒千里光碱和千里光宁3种吡咯烷生物碱(PA)所致的急性肝窦阻塞综合征(HSOS)小鼠模型，并对3种模型进行评价。方法:将48只雄性C57小鼠分为4组：对照组、野百合碱组、倒千里光碱组和千里光宁组(每组12只)，分别予以PBS(300 μL)、野百合碱溶液(800 mg/kg)、倒千里光碱溶液(100 mg/kg)、千里光宁溶液(100 mg/kg)灌胃1次。于灌胃后24 h分析4组小鼠死亡数、成模数、肝功能和肝脏病理形态学变化。统计学方法采用单因素方差分析、Bonferroni法、卡方检验。结果:灌胃后24 h时野百合碱组、倒千里光碱组、千里光宁组分别死亡0、9、0只，存活小鼠成模9、3、6只，3组死亡数比较差异有统计学意义( χ2＝21.734， P<0.05)，成模数比较差异无统计学意义( χ2＝2.836， P>0.05)。野百合碱组、倒千里光碱组、千里光宁组ALT水平分别为(111.72±37.62)、(562.97±242.42)、(3 891.40±1 009.44) U/L，AST水平分别为(156.96±64.95)、(331.22±120.83)、(2 107.55±532.80) U/L，TBil水平分别为(41.66±10.42)、(79.43±18.45)、(120.80±17.44) μmol/L，均高于对照组[分别为(31.40±10.98) U/L、(34.66±13.00) U/L、(16.91±2.89) μmol/L]，差异均有统计学意义(Bonferroni法， P均<0.008 3)；倒千里光碱组与千里光宁组ALT、AST水平比较差异均有统计学意义(Bonferroni法， P均<0.008 3)，TBil水平比较差异无统计学意义( P>0.008 3)；倒千里光碱组与野百合碱组TBil水平比较差异有统计学意义(Bonferroni法， P＝0.002)，ALT、AST水平比较差异均无统计学意义( P均>0.008 3)；千里光宁组与野百合碱组ALT、AST和TBil水平比较差异均有统计学意义(Bonferroni法， P均<0.008 3)。野百合碱组、倒千里光碱组、千里光宁组小鼠肝组织可见肝细胞凝固性坏死，中央静脉内皮下出血，肝窦扩张，红细胞淤滞于肝血窦中，正常的小叶结构被破坏；野百合碱组和倒千里光碱组主要表现为肝腺泡3区肝细胞坏死、肝窦扩张淤血；千里光宁组主要表现为肝腺泡1区和2区肝细胞坏死和淤血。野百合碱组成模小鼠的肝组织病理学改变为中、重度，倒千里光碱组、千里光宁组均为重度。 结论:成功建立了野百合碱、倒千里光碱和千里光宁3种PA所致小鼠急性HSOS模型，其中野百合碱更合适。

目的:明确肺高血压(PH)大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达的变化。方法:SPF级健康雄性SD大鼠16只，8周龄，体质量200~220 g，采用随机数字表法分为2组( n＝8)：对照组(C1组)和PH1组。采用皮下注射野百合碱的方法制备大鼠PH模型。模型制备开始后28 d时，测量大鼠平均肺动脉压力(mPAP)，计算Fulton指数，计算肺中小动脉中膜厚度百分比，计算肌化血管百分比，Western blot法检测肺组织TRAF6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT3)和G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)表达，计算p-STAT3/STAT3，免疫共沉淀法检测TRAF6与STAT3的相互作用。原代培养正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(C2组)和PH大鼠肺动脉平滑肌细胞(PH2组)于6孔板( n＝3)。采用qPCR法检测TRAF6 mRNA表达，Western blot法检测TRAF6、STAT3、p-STAT3和Cyclin D1表达。 结果:与C1组比较，PH1组大鼠mPAP、Fulton指数、肺中小动脉中膜厚度百分比及肌化血管百分比升高，肺组织TRAF6和Cyclin D1表达上调，p-STAT3/STAT3升高( P<0.05或0.01)，免疫共沉淀结果显示，TRAF6和STAT3相互作用。与C2组比较，PH2组TRAF6及其mRNA表达上调，Cyclin D1表达上调，p-STAT3/STAT3升高( P<0.05或0.01)。 结论:PH大鼠肺组织TRAF6表达上调，可能与促进STAT3活化，导致肺血管重构有关。

目的:观察胡桃醌(Juglone)对野百合碱(MCT)诱导肺动脉高压(PAH)大鼠内皮间充质转化(EndoMT)的影响。方法:采用随机数字表法将30只Sprague Dawley (SD)大鼠分为3组：正常对照组(Con)，PAH组，Juglone组，每组10只。通过MCT建立PAH模型。Juglone组于MCT干预2周后每天给予Juglone腹腔内注射；4周后，检测右心室收缩压(RVSP)及右心肥厚指数(RVHI)，并用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肺血管形态的改变；免疫荧光法测定大鼠肺小动脉壁中α-肌动蛋白(α-SMA)和血管性血友病因子(vWF)的表达；蛋白印迹法(Western blot)检测各组大鼠肺组织EndoMT相关蛋白的表达水平。多组间均数比较采用单因素方差分析。结果:PAH组大鼠体重低于Con组[(273.00±39.12) g比(408.90±17.63) g， q＝15.774， P<0.05]，而RVSP及RVHI则高于Con组[(39.66±5.26) mmHg、(44.02±5.47)%比(18.71±1.72) mmHg、(22.96±3.50)%， q＝17.255、16.126， P<0.05]；Juglone组大鼠体重高于PAH组[(346.30±16.12) g比(273.00±39.12) g， q＝8.320， P<0.05]，RVSP及RVHI则低于PAH组[(23.16±3.29) mmHg、(34.03±2.04)%比(39.66±5.26) mmHg、(44.02±5.47)%， q＝13.289、7.480， P<0.05]。HE染色示，PAH组肺小动脉管壁增厚；内皮细胞大部分脱落，部分空泡变性。Juglone干预后管壁明显变薄；内皮细胞分布均匀。免疫荧光染色示Con组内皮层vWF表达为强阳性，未见α-SMA表达；PAH组内皮层vWF表达减弱，α-SMA为表达加强，出现vWF和α-SMA的双阳性染色，Juglone组内皮层vWF表达增强，α-SMA表达减弱，双阳性染色细胞明显减少。Western blot示，PAH组中vWF，血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)相对表达量低于Con组(0.54±0.17比0.83±0.01、0.61±0.16比1.06±0.03， q＝4.517，8.231， P<0.05)；Juglone组vWF，VE-cadherin蛋白相对表达量高于PAH组(0.78±0.09比0.54±0.17、0.84±0.02比0.61±0.16， q＝3.738、4.207， P<0.05)；PAH组中波形蛋白(Vimentin)、α-SMA、脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)相对表达量高于Con组(1.10±0.05比0.70±0.09、0.94±0.07比0.53±0.06、1.01±0.07比0.48±0.01， q＝7.965、9.547、11.416， P<0.05)；Juglone组Vimentin、α-SMA、Pin1相对表达量低于于PAH组(0.86±0.11比1.10±0.05，0.63±0.09比0.94±0.07、0.73±0.12比1.01±0.07， q＝4.779、7.218、6.031， P<0.05)。 结论:胡桃醌能够减轻MCT诱导的PAH，其机制可能与其通过抑制Pin1进而抑制肺动脉EndoMT有关。

目的:应用超声心动图评估西那卡塞对野百合碱(MCT)诱导的动脉性肺动脉高压(PAH)大鼠右心结构功能的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为对照组、PAH组、西那卡塞组，每组10只。西那卡塞组给予盐酸西那卡塞30 mg/kg腹腔注射，对照组和PAH组分别予以等体积溶剂。超声心动图参数：右室壁厚度(RVWT)、右室基底段内径(RVD)、左室偏心指数(EI)、三尖瓣环收缩期位移(TAPSE) 、右室面积变化分数(RVFAC)、三尖瓣环收缩期峰值速度(s′)、右室四腔纵向应变(RV4CSL)及右室游离壁纵向应变(RVFWSL)等。组织病理学参数：肺小动脉管壁厚度(WT)、右室心肌细胞直径(RV cell-D)、胶原体积分数(CVF)及右室肥厚指数(RVI)。比较各组间超声及病理学参数，分析右室病理改变与超声应变参数间的相关性。结果:①与对照组相比，PAH组WT、RV cell-D、CVF及RVI增加(均 P<0.01)，右心增大、右室肥厚(均 P<0.05)，右室纵向应变减低( P<0.01)。②与PAH组相比，西那卡塞组WT、RV cell-D、CVF及RVI减低(均 P<0.01)，右室结构功能改善(均 P<0.05)；上述参数与对照组比较差异无统计学意义(均 P>0.05)。③相关性分析：右室重构参数CVF、RV cell-D与WT呈正相关( rs＝0.706 3，0.629 4；均 P<0.05)；RVFWSL与CVF、RV cell-D间具有良好相关性( rs＝－0.685 3， r＝－0.767 2；均 P<0.05)。 结论:西那卡塞干预的PAH大鼠右室逆重构，功能得以保留，提示西那卡塞对PAH大鼠右室结构、功能具有保护作用。